[發明專利]一種UPLC-MS-MS快速篩查茵陳蒿與濱蒿不同基源差異性的方法

有效

• 申請號: 201711404655.5
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN108037207B
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: 王長軍;丁青;何民友;劉曉霞;汪艷秋
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州致信偉盛知識產權代理有限公司 44253
• 代理人: 彭玲

本發明公開了一種UPLC?MS?MS快速篩查茵陳蒿與濱蒿不同基源差異性的方法，包括：（1）收集待區分的茵陳蒿與濱蒿藥材，制成標準湯劑樣品；（2）將樣品進入UPLC?MS?MS系統分析，得到對應的質譜數據；（3）將原始采集的數據直接導入至Compound Discoverer2.1，進行數據分析；（4）采用動態規劃計算法校正色譜峰漂移，對齊色譜峰，利用最鄰近聚類方法將保留時間較為接近的物質注冊成為一個化合物；（5）利用方差分析計算樣品間差異性的物質，確定不同基源的差異性。本發明將化合物質譜信息輸出為原始文件，不需轉換成其他格式，可直接導入至Compound Discoverer2.1庫中搜索化合物，該方法能夠實現快速鎖定中藥材樣本中存在的差異性化合物，適用于大批量樣本快速分析測定。

技術領域

本發明涉及中藥成分研究技術領域，具體涉及一種UPLC-MS-MS快速篩查茵陳蒿與濱蒿不同基源差異性的方法。

背景技術

茵陳為菊科多年生植物濱蒿Artemisia scoparia Waldst.etKit.或茵陳蒿Artemisia capillaris Thunb.的干燥地上部分，根據采收季節的不同，《中國藥典》2015版收載茵陳有兩種，分別為綿茵陳與花茵陳。春季采收的茵陳為綿茵陳，秋季采割的茵陳為花茵陳。

茵陳為常用中藥，始載于《神農本草經》，列為上品，具有清熱利濕、利膽退黃的作用，用于黃疸尿少，濕溫暑濕，濕瘡瘙癢，是臨床上常用的保肝中藥。濱蒿和茵陳蒿由于基源不同，也會存在化學成分的差異。因此，對不同基源的同種藥材進行篩選，對于提升中藥品質具有重要的實際意義。

目前對中藥分析物質準確提取分析，進而用于篩查不同基源之間具有差異化化學成分的方法非常少，當前能夠完成這一工作的方法有HPLC、IR、NIR、TLC等。但這些方法中存在大量的假陽性和假陰性問題，導致利用這些方法進行分析時，可能漏掉重要的物質信息，進而導致所篩選出的差異性物質無法有效表征組別差異，對確定不同基源的同種中藥材鑒別帶來困難。

發明內容

為解決上述問題，本發明的目的在于提供一種快速、準確度高的UPLC-MS-MS快速篩查茵陳蒿與濱蒿不同基源差異性的方法。

本發明是通過以下技術方案實現：

一種UPLC-MS-MS快速篩查茵陳蒿與濱蒿不同基源差異性的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)收集待區分的茵陳蒿與濱蒿藥材，將基源相同的不同批次的茵陳蒿藥材和濱蒿藥材分別各為一組，將每組茵陳蒿藥材和濱蒿藥材制成相應的茵陳蒿標準湯劑樣品和濱蒿標準湯劑樣品，粉碎，過60目篩，于-20℃下避光保存；

(2)取步驟(1)的茵陳蒿與濱蒿標準湯劑樣品各0.5g，精密稱定，分別置具塞錐形瓶中，精密加入50-70％乙醇25ml，稱定重量，超聲處理20-40分鐘，放冷，再稱定重量，用50-70％乙醇補足減失的重量，搖勻，離心，精密量取上清液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50-70％乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，得到供試品溶液，隨后進入UPLC-MS-MS系統進行分析，分別得到每個茵陳蒿與濱蒿標準湯劑樣品對應的質譜數據；

(3)將步驟(2)采集的數據直接導入至Compound Discoverer2.1，然后進行數據分析，針對每個樣品進行色譜峰提取和質譜信息表征；

(4)選擇物質色譜峰數量最多的樣品作為參照樣品，采用動態規劃計算法校正樣品間的色譜峰漂移，對齊屬于同一物質的色譜峰，然后利用最鄰近聚類方法將保留時間較為接近的物質注冊成為一個化合物，最終建立一個樣品和色譜峰的注冊圖表；經過外標校正后，用于后續的分析；