[發明專利]一種氯霉素的化學發光檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201711402934.8
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN108088992A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: 劉麗青;曹晶;常燕;胡雪婷;杜愛銘;徐兵
• 申請（專利權）人: 太原瑞盛生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種氯霉素化學發光檢測試劑盒及其制備方法。該試劑盒包括：吖啶酯標記物、偶聯有抗原或抗體的磁微粒、氯霉素校準品溶液、清洗液、化學發光預激發液A、化學發光激發液B。本發明試劑盒以磁分離化學發光技術為檢測手段，同時結合吖啶酯標記技術。本發明試劑盒操作簡單方便，反應條件溫和，發光值穩定，受外界條件影響少；與現有技術相比，具有靈敏度高、檢測快速方便、準確性高、重復性好、特異性強等優點。

技術領域

本發明屬于免疫檢測分析技術領域，具體涉及一種氯霉素的化學發光檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術

氯霉素 ( Chloramphenicol , CAP )，是由Ehrlich于1947年分離出來的一種廣譜抗生素，氯霉素可作用于細菌核糖核蛋白體的50S亞基，它可以阻撓蛋白質的合成，對革蘭氏陽性、革蘭氏陰性細菌均有抑制作用。由于氯霉素具有價格低廉、抗菌性優良、藥性穩定的特點，因而廣泛用于各種動物性傳染疾病的治療，對各類家禽、家畜、水產品及蜂蜜制品各種傳染性疾病的控制和治療起重要作用。但氯霉素有嚴重的毒副作用，能引起再生障礙性貧血癥和新生兒灰色綜合癥等。因此，歐盟、美國、我國以及其他國家嚴禁氯霉素在動物上使用。目前我國動物源食品中氯霉素殘留仍很嚴重，因此，為保障人民的身體健康，迫切需要建立靈敏度高，特異性強的檢驗方法。

目前用于檢測氯霉素的方法主要有高效液相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜-質譜/質譜法、膠體金免疫分析法、酶聯免疫分析法、化學發光酶聯免疫法等。其中，高效液相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜-質譜/質譜法需要大型精密儀器，繁瑣耗時，檢測費用高昂，檢測樣本有限，不適應大批量樣本的檢測；膠體金免疫分析法的檢測是以肉眼可見的顏色進行表征，存在誤差較大，操作繁瑣、流程較多、靈敏度低、精度不高等缺點；酶聯免疫分析法存在靈敏度低、不易實現全自動化、檢測時間長等的缺點；CN104165990 A（2014.11）公開了一種氯霉素的化學發光酶聯免疫檢測試劑盒及使用方法，該試劑盒采用辣根過氧化物酶作為標記物，采用辣根過氧化物酶主要缺點為：魯米諾在沒有辣根過氧化物酶存在情況下，也會被H2O2氧化自身發光，本底相對較高，影響信噪比，反應動力學復雜，影響因素多，結果不夠穩定，要得到靈敏度高且平臺期長的底物不容易。因此建立一種有效、快速、簡單、靈敏、抗干擾性高的檢測氯霉素的方法具有十分重要的意義。

本發明以磁分離化學發光技術為檢測手段，同時結合吖啶酯標記技術進行檢測。

吖啶取代物作為化學發光標記物用于免疫分析具有許多優越性，主要有：①化學反應簡單、快速、無需催化劑，在有H2O2的稀堿性溶液中即能發光；②背景發光低，信噪比高，發光反應干擾因素少；③發光類型為閃光型發光，光釋放快速集中、發光效率高、發光強度大；④吖啶酯分子量小，避免遮蔽抗體結合位點，可提高系統整體靈敏度；⑤易于與蛋白質聯結且聯結后光子產率不減少；⑥標記物穩定，不受環境氧化劑的影響，在2-8℃下可保存數月之久。因此吖啶取代物是一類非常有效的化學發光標記物。

磁分離免疫檢測技術是一種以磁性微粒為固相分離載體而建立的一種新型免疫檢測方法，該方法可使抗原、抗體的結合反應在近似液相的條件下進行，因而反應快速、徹底。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術的不足，提供一種操作簡便、靈敏度更高、反應快速、穩定、準確地定量測定氯霉素的磁微粒化學發光測定試劑盒。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：

一種氯霉素的化學發光試劑盒及其制備方法，本發明所提供的氯霉素的化學發光試劑盒，包括以下組分：偶聯有抗體或抗原的磁微粒、吖啶酯標記的抗原或抗體、氯霉素校準品溶液、清洗液、化學發光預激發液A以及化學發光激發液B。