[發(fā)明專利]一次性快速分離靈芝活性多糖肽與三萜酸的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711399716.3
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN107903331A
• 公開（公告）日: 2018-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 林樹錢;林冬梅;王賽貞;林占熺;羅虹建;王聯(lián)福;郭嘉銘
• 申請（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)大菌草技術(shù)開發(fā)公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K36/074
• 代理公司: 福州展暉專利事務(wù)所(普通合伙)35201
• 代理人: 林天凱

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一次性快速分離靈芝活性多糖肽和三萜類合的制備方法，尤其涉及膜分離分子量的技術(shù)在分離靈芝提取液中一次性得到主要活性成分的制備方法。

技術(shù)背景

靈芝是中醫(yī)藥學(xué)寶庫中的珍品，根據(jù)《中華人民共和國藥典（一部）》（2000，2005，2010年版）收載靈芝（赤芝、紫芝），作為中藥材。靈芝隸屬于擔子菌綱，多孔菌科，靈芝屬的真菌（赤芝、紫芝等的總稱。在我國有兩千多年的藥用史，在東漢時期的《神農(nóng)本草經(jīng)》，明代著名的《本草綱目》均證明，靈芝有防病治病，延年益壽之功效。國內(nèi)外的大量研究結(jié)果表明，靈芝具有廣泛的藥理活性，且毒性較低，靈芝的化學(xué)成分復(fù)雜，主要有多糖類，三萜類，生物堿，核苷類及微量元素。

國內(nèi)外已有研究資料表明：靈芝主要活性成分多糖與三萜類化合物，并作為質(zhì)量控制的指標。本文作者在國內(nèi)外也發(fā)表有關(guān)靈芝活性研究論文和專著及專利：林志彬主編“靈芝的現(xiàn)代研究”第四版，北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版，2015:129～374.中國專利DL200410014681.3，靈芝多糖蛋白及其制備方法與用途。該專利發(fā)明從靈芝中獲得一種高分子量GL-PP方法與用途。中國專利CN101704903A，稱一種低分子靈芝多糖的制備方法，得到分子量4000～6000，它通過水提，濃縮，分級丙酮沉淀，離心干燥而成。活性天然產(chǎn)物的分離經(jīng)典方法從早期迄今一直被采用的方法，傳統(tǒng)的技術(shù)都是通過提取分離靈芝各類化合物，總是先醇提或水提濃縮或醇或丙酮沉淀，再通過透析法，以及經(jīng)典的去離子或離子交換樹脂柱后色譜法純化等繁雜工序。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決靈芝復(fù)雜活性成分的提取成分的提取與分離的問題。提供一種根據(jù)化合物的分子量一次性高純度的分離靈芝活性多糖肽與三萜酸化合物制備方法。

一種一次性快速分離靈芝活性多糖肽與靈芝三萜酸的方法，取靈芝制備液微濾后的透過液依次通過10KDa、6KDa、1KDa大小不同的孔徑，從大到小截留不同分子量而得到不同分子量的透過液，實現(xiàn)靈芝活性多糖肽與靈芝三萜酸的分離。

秤取靈芝切片或破碎絲狀物，加水12～20倍重量無離子水，在室溫浸泡2～4小時，然后加熱90～100℃提取1.5～2小時，過濾，濾渣用10～15倍水以同樣溫度提取1～1.5小時，過濾，合并二次的過濾液， 3000～4500r/min離心粗濾，取上述靈芝提取液置真空濃縮，溫度65℃，真空度為-0.09～-0.097MPa，濃縮比重為1.10，獲靈芝提取制備液；取靈芝提取制備液在加壓條件下，通過10μm～0.2μm微孔濾膜的透過液為靈芝提取原液，提取得率為14.74%；然后將靈芝提取原液采用超濾膜進行超濾，超濾膜采用10KD，6KD和1KD，分別得到三種不同分子量的超濾液，然后將所得三種不同組的超濾液分別蒸發(fā)至干，用標準對照品經(jīng)高效液相測定，確定三種分別為靈芝多糖肽，低分子靈芝多糖肽和三萜酸。

綜上所述的，本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)如下優(yōu)點：

本發(fā)明直接截留靈芝不同化合物的分子量，可一次性快速分離靈芝活性成分多糖肽和靈芝三萜酸化合物等制備方法，與傳統(tǒng)技術(shù)相比，其工藝簡便、快速、產(chǎn)量高，又無污染，適合于工業(yè)化生產(chǎn)的方法。

附圖說明

圖1分離靈芝各類化合物分子量工藝路線。

圖2菌草靈芝提取原液中分子量GPC凝膠滲透色譜圖。

圖3 HPLC法測定菌草靈芝10KDa分子量GPC色譜圖。

圖4 HPLC法測定菌草靈芝1KDa分子量GPC色譜圖。

圖5 HPLC紫外檢測器測定菌草靈芝三萜酸結(jié)果圖。

圖6靈芝三萜酸A，B ，C，D對照品標準圖。

圖7靈芝多糖肽含量測定標準曲線圖。

圖8靈芝口服液生產(chǎn)工藝流程。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進行更詳細的描述。

實施例1