[發明專利]一種酶化學發光法測定尿酸的檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201711397762.X
• 申請日: 2017-12-21
• 公開（公告）號: CN108107199A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 李民友;林偉榮;張玲;藺濤
• 申請（專利權）人: 廣州市進德生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 廣州勝沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 孫文卉

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種酶化學發光法測定尿酸的檢測試劑盒。本發明利用尿酸酶催化尿酸氧化成尿囊素和過氧化氫，過氧化氫直接與發光底物反應形成一種持續性的高強度化學信號(無需過氧化物酶)。與傳統的酶比色法和化學發光法相比，此法不需要添加過氧化氫酶催化過氧化氫而直接與底物反應發光，可以用于全自動發光儀，能滿足臨床自動化大批量檢測。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種酶化學發光法測定尿酸的檢測試劑盒。

背景技術

尿酸(2,4,6-三羥基嘌呤,簡稱UA)分子式為C₅H₄N₄O₃，其分子量MW＝168.11。它是一種白色結晶性物質，較難溶于水、難溶于酸，也難溶于醚和乙醇，具有弱堿性，可以與強酸成鹽。尿酸在生物體內以鹽的形式存在，因而溶解度較高。尿酸是人體內在的嘌呤代謝終產物，大部分隨尿液排出體外，少部分通過糞便和汗液排出。血漿尿酸正常值：男：149～416μmol/L，女：89～357μmol/L。當人體內嘌呤代謝紊亂，血漿中尿酸濃度過高稱為高尿酸血癥(HUA)。尿酸的溶解度低，在血管壁沉積易誘發痛風、繼發性高血壓、腦梗死、糖尿病、充血性心力衰竭、輸尿管結石和腎臟疾病等，嚴重時造成腎衰，甚至危及生命。

血中尿酸全部從腎小球濾過，其中98％在近端腎小管起始部重吸收，然后50％在近端腎小管中部又被分泌到腎小管腔內，在近端腎小管末部又有40％～44％被重吸收，只有6％～10％的尿酸排出。正常人體內尿酸的生成與排泄較恒定，體液內尿酸含量變化，可以充分反映出人體內代謝、免疫等機能的狀況。因此臨床檢測血清尿酸濃度對實驗診斷痛風和腎臟等疾病具有重要的參考價值。

目前實驗室檢測尿酸出現了一種化學發光檢測方法，如中國專利申請CN1912599公開的一種血清中尿酸的化學發光測定方法，其特征是，尿酸在尿酸酶催化下被氧化，生成H₂O₂，在過氧化氫酶作用下，使H₂O₂生成水和單氧，單氧可以使發光底物(一般為魯米諾)氧化，發出光信號，光信號的大小與血清尿酸的濃度呈正相關。用已知濃度的血清尿酸與測出的發光信號，作出劑量-反應曲線，從而根據該曲線推算出待測樣品中的尿酸含量。但是該方法是以魯米諾、異魯米諾及其衍生物作為發光底物，其一般需添加過氧化物酶等催化劑，這些試劑組分的穩定性較差，而且過氧化物酶的特異性不高，由于過氧化氫在該反應中是作為主要的中間產物，因而在測定過程中容易受到干擾。

其次，目前在檢測尿酸過程中最不能忽視的就是樣本中存在的內源性物質如血紅蛋白、膽紅素及來源于臨床藥物應用的外源性物質，如抗壞血酸對反應造成的干擾，導致所測結果與真實值存在一定的差異。

因此，針對上述技術問題，有必要提供一種質量穩定，且能有效抗干擾，準確度高的用于檢測血液中尿酸的試劑盒。

發明內容

本發明旨在提供一種酶化學發光法測定尿酸的檢測試劑盒，該試劑盒利用尿酸酶催化尿酸氧化成尿囊素和過氧化氫，過氧化氫直接與發光底物反應形成一種持續性的高強度化學信號(無需過氧化物酶)，通過過氧化氫與底物產生的光信號計算待測物含量，同時，其抗干擾能力強，準確度高，更適合臨床使用。

為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案：一種酶化學發光法測定尿酸的檢測試劑盒，包括試劑R1、試劑R2和試劑R3，所述試劑R1包含以下組分及濃度：

所述試劑R2包含以下組分及濃度：

所述試劑R3的組分為：

發光底物：Lumigen HyPerBlu。

進一步地，所述試劑R1中緩沖液pH為6.5-8.5，其選自磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、醋酸緩沖液和HEPES緩沖液中的一種或幾種。