[發(fā)明專利]CD3×B7H3雙特異抗體定向殺傷耐阿霉素膀胱癌細(xì)胞PUMC-91/ADM的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711397309.9
• 申請(qǐng)日: 2017-12-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109939126A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-06-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張曼;馬婉茹;張敏;雷婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張曼
• 主分類號(hào): A61K35/17
• 分類號(hào): A61K35/17;A61K47/68;A61P35/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明的目的在于提供一種偶聯(lián)CD3×B7H3雙特異性抗體定向殺傷耐阿霉素人移行細(xì)胞膀胱癌細(xì)胞PUMC?91/ADM的應(yīng)用，具體為偶聯(lián)CD3×B7H3雙特異性抗體可增強(qiáng)活化T細(xì)胞（ATC）對(duì)PUMC?91/ADM耐阿霉素膀胱癌細(xì)胞的殺傷作用，為膀胱癌耐藥的靶向治療提供新的免疫治療靶點(diǎn)。本發(fā)明通過(guò)研究證實(shí)B7H3在PUMC?91/ADM耐阿霉素膀胱癌細(xì)胞中高表達(dá)；與未偶聯(lián)CD3×B7H3雙特異性抗體的ATC相比，結(jié)合CD3×B7H3雙特異性抗體的ATC定向殺傷PUMC?91/ADM耐阿霉素膀胱癌細(xì)胞的能力增強(qiáng)，對(duì)PUMC?91/ADM耐阿霉素膀胱癌細(xì)胞具有顯著細(xì)胞毒活性。當(dāng)結(jié)合CD3×B7H3雙特異性抗體的ATC與腫瘤細(xì)胞在效靶比為10:1條件下共培養(yǎng)時(shí)殺傷效果明顯增加。同時(shí)，結(jié)合CD3×B7H3雙特異性抗體的ATC分泌γ?干擾素（IFN?γ）和α?腫瘤壞死因子（TNF?α）水平增加。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明的目的在于提供一種偶聯(lián)CD3×B7H3雙特異性抗體定向殺傷耐阿霉素人移行細(xì)胞膀胱癌細(xì)胞PUMC-91/ADM的應(yīng)用，具體為偶聯(lián)CD3×B7H3雙特異性抗體可增強(qiáng)活化T細(xì)胞（ATC）對(duì)PUMC-91/ADM耐阿霉素人移行細(xì)胞膀胱癌細(xì)胞的殺傷作用，為膀胱癌耐藥的靶向治療提供新的免疫治療靶點(diǎn)。

背景技術(shù)

膀胱癌是男性中第四常見(jiàn)的癌癥，女性中第11常見(jiàn)的癌癥。2017年在美國(guó)估計(jì)有79030例新發(fā)膀胱癌病例和19870例死亡病例，其中男性發(fā)病率和死亡率高于女性4倍。最初，約85%的膀胱癌患者被診斷為淺表性膀胱癌，超過(guò)50%的淺表性膀胱癌會(huì)復(fù)發(fā)，并且，僅有46%的三期患者和15%的4期患者可以達(dá)到五年生存。因此，膀胱癌患者所面臨的形式非常嚴(yán)峻。盡管存在多種治療方法，比如說(shuō)手術(shù)，放療，化療，膀胱癌的術(shù)后生存率依舊很不理想。這些治療方法可以限制腫瘤的發(fā)展及生長(zhǎng)，但它們無(wú)法遏制腫瘤的復(fù)發(fā)和耐藥的產(chǎn)生。因此，發(fā)展新的療法對(duì)膀胱癌患者是至關(guān)重要的。

隨著免疫學(xué)的研究進(jìn)展，免疫治療被公認(rèn)為二十一世紀(jì)腫瘤綜合治療模式中第四種治療方法。例如，靶向CTLA-4（細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原4）和PD-1/PD-L（程序化細(xì)胞死亡1/ PD-1配體）的免疫檢查點(diǎn)抑制劑已經(jīng)促進(jìn)了癌癥的治療，另一個(gè)有效的方法是靶向T細(xì)胞抗原受體T細(xì)胞（TCR）和腫瘤相關(guān)抗原（TAA）的雙特異性抗體（BiAb）的運(yùn)用。

在過(guò)去兩年里，雙特異性抗體靶向不同的腫瘤相關(guān)抗原，包括EGFR,Her2,CD19,CD20,CD30,CEA,CA125,PSA等已在實(shí)驗(yàn)和臨床研究中取得令人鼓舞的成果。B7H3，也稱為CD276，與B7家族有著高達(dá)30%相同的氨基酸。它高度表達(dá)在多種類型的癌癥中，并已被證明能促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展和癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，包括急性白血病，膠質(zhì)瘤，肝細(xì)胞癌，肺癌，乳腺癌，前列腺癌，骨肉瘤，皮膚黑色素瘤和胰腺癌。Luo等人證明了小鼠B7H3的基因轉(zhuǎn)移產(chǎn)生了有效的抗腫瘤免疫反應(yīng)，Lupu等在小鼠原位結(jié)腸癌模型中注射含B7H3的腺病毒，發(fā)現(xiàn)可抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移，MJ18，一種抗B7H3鼠抗，在胰腺癌模型中被證明可抑制腫瘤的生長(zhǎng)。研究結(jié)果表明B7H3有望用于基于免疫的抗腫瘤治療。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種偶聯(lián)CD3×B7H3雙特異性抗體定向殺傷耐阿霉素人移行細(xì)胞膀胱癌細(xì)胞PUMC-91/ADM的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述膀胱癌耐藥細(xì)胞為PUMC-91/ADM耐阿霉素人移行細(xì)胞膀胱癌細(xì)胞。

優(yōu)選地，所述偶聯(lián)CD3×B7H3雙特異性抗體的結(jié)構(gòu)如圖1。

優(yōu)選地，所述雙特異性抗體可增強(qiáng)活化T細(xì)胞對(duì)PUMC-91/ADM耐阿霉素人移行細(xì)胞膀胱癌細(xì)胞的殺傷作用。

優(yōu)選地，所述活化T細(xì)胞分泌γ-干擾素和α-腫瘤壞死因子水平增加。

優(yōu)選地，所述結(jié)合CD3×B7H3雙特異性抗體的活化T細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞在效靶比為10:1時(shí)，殺傷作用明顯增加。