[發明專利]一株貝萊斯芽孢桿菌在防治黃瓜疫病中的應用

有效

• 申請號: 201711396282.1
• 申請日: 2017-12-21
• 公開（公告）號: CN107937312B
• 公開（公告）日: 2019-10-01
• 發明（設計）人: 游泳;蘭成忠;阮宏椿
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

本發明提供了一株貝萊斯芽孢桿菌在防治黃瓜疫病中的應用，所述拮抗菌FJ17?4分類命名為貝萊斯芽孢桿菌（Bacillusvelezensis），已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC No.14642。本發明還公開了所述拮抗菌發酵液在防治黃瓜疫病中的應用。本發明對減少化學農藥的使用和減輕農業面源污染具有重要的作用。

技術領域

本發明涉及微生物種質資源的開發與利用領域，具體涉及一株貝萊斯芽孢桿菌在防治黃瓜疫病中的應用。

背景技術

由瓜疫霉菌（Phytophthora melonis）侵染引起的黃瓜疫病（CucumberPhytophthora blight）黃瓜生產上的一種毀滅性土傳病害，在黃瓜的整個生育期均可發病，為害植株的葉、莖、根和果實。該病害具有傳播速速快、侵染力強等特點，若剛發病時疏于防治，一旦流行則很難控制，可造成黃瓜大面積死亡，造成的直接經濟損失十分嚴重，輕者減產30%-50%，嚴重時全田絕收。近年來，隨著我國黃瓜設施栽培技術的迅速發展，設施條件為黃瓜生長提供了適宜的溫、濕度，但適宜黃瓜生長的溫、濕度條件也適宜黃瓜疫病的發生與流行，因此黃瓜疫病發生呈逐年嚴重趨勢，在全國各地均有不同程度的發生，受害較重的地區為南方地區的春黃瓜和北方地區的秋黃瓜，該病已成為制約黃瓜產量的重要因素之一。目前，黃瓜疫病的防治仍以化學防治為主，化學農藥的大量、反復使用，不僅造成了病原菌抗藥性的產生，致使化學藥劑的防治效果越來越差，而且化學藥劑對環境存在一定的危害，可污染水體、大氣和土壤，并殘留在農產品中，危害人類健康。因此，植物病害的綠色防治技術的開發與利用是現代農業可持續發展所迫切需求的，利用有益微生物防治植物土傳病害是植物病害綠色防治關鍵技術之一，并取得了一定的成果，一些生物農藥也相繼問世。

本發明從健康黃瓜根部土壤中分離到一株對黃瓜疫病菌具有較高拮抗能力的細菌，經微生物分類學鑒定為貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）。本發明為微生物源農藥的進一步研制和開發提供優良的出發菌株，同時對對促進黃瓜產為的健康生產發展、增加瓜農收入、保障消費者健康、減少環境污染和維持農業可持續發展具有重大的理論和生產意義。

發明內容

本發明目的在于針對黃瓜疫病防治中化學農藥大量使用造成了病原菌抗藥性產生、污染環境和農產品農藥殘留等一系列問題，提供了一株貝萊斯芽孢桿菌在防治黃瓜疫病中的應用。

本發明目的通過以下技術方案來實現：

從福建福州、福安、霞浦及三明等黃瓜種植地采集健康黃瓜根部土樣，采用平板稀釋法對所采集土樣中的細菌進行分離，所使的培養基為LB（胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，氯化鈉5 g，瓊脂15g，水1000mL，pH 7.2）。根據不同菌落形態，對所分離細菌進行純化，共分離純化得到326株細菌。然后以黃瓜疫病菌為目標病原菌，采用平板對峙培養法對所純化細菌對黃瓜疫病菌的拮抗能力進行測定，得到對黃瓜疫病菌具有拮抗作用初篩細菌18株。通過室內盆栽試驗，進一步對初篩菌株的防病能力進行評估，最終得到具拮抗作用又有盆栽防治作用的菌株6株。綜合拮抗和盆栽防病能力，選取FJ17-4拮抗菌為代表，通過形態學、生理生化及分子生物學16s rDNA鑒定，所分離菌株FJ17-4為貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis），已于2017年9月18日保藏于位于北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.14642。

上述貝萊斯芽孢桿菌FJ17-4在防治黃瓜疫病方面的應用。