[發明專利]一種提取基因組DNA的試劑盒有效
| 申請號: | 201711388508.3 | 申請日: | 2015-02-11 |
| 公開(公告)號: | CN108048449B | 公開(公告)日: | 2021-10-08 |
| 發明(設計)人: | 林源吉;丁佳女;葉俊波;洪巧娟 | 申請(專利權)人: | 杭州百邁生物股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 311228 浙江省杭州市大江東產*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 提取 基因組 dna 試劑盒 | ||
1.提取基因組DNA的試劑盒在提取植物基因組DNA的應用,所述試劑盒包括試劑1、試劑2和試劑3,其中所述試劑1包括以下組分:0.1%-5%的十六烷基三甲基溴化銨(質量百分比)、10mM-200mM的Tris、10mM-200mM的EDTA、0.1%-10%的PVP(質量百分比)、0.1M-5M的NaCl、溶劑為去離子水;試劑2包括以下組分:0.1M-6.5M的鹽酸胍、1%-50%的乙醇(體積百分比)、0.1M-2M的檸檬酸鈉、溶劑為去離子水;試劑3包括以下組分:0.1M-8M的鹽酸胍、0.05M-0.2M的甘氨酸、溶劑為去離子水,其特征在于,在沉淀非DNA的雜質步驟中,在裂解的樣品細胞中加入試劑2,混勻后冰浴。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,還包括洗滌液和/或洗脫液。
3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述的洗滌液包括去蛋白洗滌液和去鹽洗滌液。
4.根據權利要求3所述的應用,其特征在于,所述去蛋白洗滌液包括1M-6M的鹽酸胍,1mM-50mM的EDTA·2Na·2H2O,溶劑為去離子水;所述去鹽洗滌液包括20mM-200mM的NaAC·3H2O,溶劑為去離子水;洗脫液為去離子水。
5.根據權利要求1至4之一所述的應用,其特征在于,試劑1的pH值為4.5-8.5,試劑2的pH值為3.3-7.5,試劑3的pH值為2.5-8.0。
6.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述的試劑1包括以下組分:3.5%的十六烷基三甲基溴化銨、120mM的Tris、110mM的EDTA、6%的PVP、3M的NaCl、溶劑為去離子水;試劑2包括以下組分:2.5M的鹽酸胍、25%的乙醇、1M的檸檬酸鈉、溶劑為去離子水;試劑3包括以下組分:4M的鹽酸胍、0.1M的甘氨酸、溶劑為去離子水。
7.根據權利要求1至4之一所述的應用,其特征在于,所述植物選自黃檀類木材、酸枝類木材、花梨類木材、楠木、黃金檀、印尼菠蘿格、大葉紫檀。
8.根據權利要求1至4之一所述的應用,其特征在于,冰浴時間為10min。
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