[發明專利]高效率的納米顆粒型雙螺旋寡RNA結構體及其制備方法

在審

• 申請號: 201711382331.6
• 申請日: 2013-01-04
• 公開（公告）號: CN107988227A
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發明（設計）人: 蔡濟旭;韓寶蘭;金韓娜;樸翰浯
• 申請（專利權）人: 株式會社百奧尼
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/10;A61K31/7088;A61P35/00;A61P31/00
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所11494
• 代理人: 陳桉

1.一種雙鏈寡RNA結構體，被具有由下式1表示的結構的化學物質結合：

式1

其中，A和B之一是親水性材料，另外一個為疏水性材料，X和Y各自是簡單的共價鍵或彼此獨立的接頭-介導的共價鍵，S是雙鏈寡RNA的有義鏈以及AS是雙鏈寡RNA的反義鏈。

2.根據權利要求1所述的雙鏈寡RNA結構體，其中如下式3所示，疏水性材料結合到雙鏈寡RNA的有義鏈的5'末端，并且親水性材料結合到其3'末端：

式3

其中，A是疏水性材料，B是親水性材料，X和Y各自是簡單的共價鍵或彼此獨立的接頭-介導的共價鍵，S是雙鏈寡RNA的有義鏈以及AS是雙鏈寡RNA的反義鏈。

3.根據權利要求1所述的雙鏈寡RNA結構體，其中雙鏈寡RNA鏈的有義和反義鏈由19-31個核苷酸組成。

4.根據權利要求3所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述核苷酸包括選自下述修飾中的一種或兩種或更多種的組合：在一個或多個核苷酸的糖結構中的2'碳的-OH基團被-CH₃(甲基)，-OCH₃(甲氧基)，-NH₂，-F(氟)，-O-2-甲氧基乙基-O-丙基，-O-2-硫基乙基(-O-2-methylthioethyl)，-O-3-氨基丙基，-O-3-二甲氨基丙基，-O-N-甲基乙酰氨基或-O-甲基乙酰氨基乙氧基取代的修飾；在核苷酸的糖結構中的氧被硫取代的修飾；以及將核苷酸之間的鍵修飾為鍵硫代磷酸酯鍵或磷酸硼鍵、甲基膦酸酯鍵；或是修飾為肽核酸(PNA)、鎖核酸(LNA)或解鎖核酸(UNA)。

5.根據權利要求1所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述磷酸基團結合到反義鏈的5'末端。

6.根據權利要求5所述的雙鏈寡RNA結構體，其中一至三個磷酸基團結合到反義鏈的5'末端。

7.根據權利要求1所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述疏水性材料具有250至1,000的分子量。

8.根據權利要求7所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述疏水性材料包括類固醇衍生物、甘油酯衍生物、甘油醚、聚丙二醇、在烴鏈的情況下為含有12-50個碳原子的飽和或不飽和烴，二酰基磷脂酰膽堿、脂肪酸、磷脂、脂多胺。

9.根據權利要求8所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述類固醇衍生物選自膽固醇、膽甾烷醇、膽酸、膽甾醇甲酸酯、膽甾烷甲酸酯和膽甾胺。

10.根據權利要求8所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述甘油酯衍生物選自單-、二-和三-甘油酯。

11.根據權利要求1所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述親水性材料具有200至10,000的分子量。

12.根據權利要求11所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述親水性材料選自聚乙二醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚惡唑啉。

13.根據權利要求1所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述共價鍵是不可降解的鍵或可降解的鍵。

14.根據權利要求13所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述不可降解的鍵是酰胺鍵或磷酸化的鍵。

15.根據權利要求13所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述可降解的鍵是二硫鍵、酸降解的鍵、酯鍵、酸酐鍵、生物可降解的鍵或酶可降解的鍵。

16.根據權利要求1所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述雙鏈寡RNA特異性地結合存活蛋白mRNA的序列。

17.根據權利要求16所述的雙鏈寡RNA結構體，其中所述雙鏈寡RNA的有義鏈的序列為5'-AAG GAG AAC AUC AUU UUC A-3'(SEQ ID NO:1)。

18.一種含有與之結合的配體的雙鏈寡RNA結構體，包括結合到根據權利要求1-17中任一項的雙鏈寡RNA結構體的親水性材料的配體。

19.根據權利要求18的含有與之結合的配體的雙鏈寡RNA結構體，其中所述配體包括通過受體介導的內吞作用(RME)，特異性地結合受體的靶向部分，促進靶細胞的內化。