[發明專利]一種均一組分低聚原花青素的制備方法

有效

• 申請號: 201711382001.7
• 申請日: 2017-12-20
• 公開（公告）號: CN109943605B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 公丕賢;沈志侖;戴春陽
• 申請（專利權）人: 威海惠安康生物科技有限公司
• 主分類號: C12P17/16
• 分類號: C12P17/16;C07D311/62;C12R1/69;C12R1/885;C12R1/685;C12R1/845;C12R1/645
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 韓獻龍

本發明提供一種均一組分低聚原花青素的制備方法，包括步驟：將經滅菌的含有原花青素的物料粉末加入水中，接種微生物進行發酵；然后經提取、脫脂、萃取、干燥得原花青素粗品；然后將原花青素粗品溶于溶劑a中，過樹脂柱，經洗脫、除去洗脫液、凍干得低聚原花青素。本發明方法得到的低聚原花青素純度高、產率高、聚合度均一、平均聚合度較小。

技術領域

本發明涉及一種天然原花青素的制備方法，特別涉及一種均一組分低聚原花青素的制備方法，屬于生物工程技術領域。

背景技術

原花青素(Proanthocyanidin，簡稱PC)是廣泛存在于植物中的多酚類化合物，是縮合單寧中的一種，由不同數量的黃烷醇類單體兒茶素(Catechin,C)、表兒茶素(Epicatechin,EC)、兒茶素沒食子酸酯(Catechin-3-O-gallate,CG)和表兒茶素沒食子酸酯(Epicatechin-3-O-gallate,ECG)縮合而成，形成二聚體直至十五聚體化合物。通常將二至四聚體稱為低聚原花青素(OPC)，將五聚體以上稱為高聚原花青素(PPC)。原花青素資源分布廣泛，存在于葡萄、花生、松樹皮、茶葉、蘋果、白樺樹、銀杏、蓮房等植物部位中，法國教授Jaeques Masquelier于1951年首次從海松樹皮中成功提取出原花青素，上世紀70年代又從葡萄籽中分離得到，這是目前主要的原花青素的來源。

原花青素因其突出的抗氧化活性而被廣泛關注，是國際公認的清除人體自由基最有效的天然抗氧化劑，其抗氧化活性遠遠高于維生素C和維生素E，約為V_E的50倍，V_C的20倍。此外，還發現原花青素可以有效降低膽固醇和低密度脂蛋白水平，預防血栓形成，有助于預防心腦血管病的發生。且原花青素是一種毒性低，非常安全的物質，毒理實驗表明，大鼠灌胃葡萄籽提取物，LD50在4000mg/kg以上，且連續灌胃60mg/kg●d 6個月無任何副作用且耐受性良好，無致畸致突變作用。目前原花青素已成為醫藥、保健品中的重要添加劑產品，由于其高效的抗氧化活性，在清除自由基和抗衰老方面尤其受消費者的青睞。

在原花青素中，OPC的活性，尤其是二聚體和三聚體要遠大于高聚體PPC。且由于PPC結構復雜，且聚合度越大，水溶性越差，不易于人體吸收，降低了生物利用率，同時PPC存在較高的收斂性，口感較差，在實際應用中制約了原花青素的發展。迄今為止已有大量文獻和專利報道制備原花青素。如，中國專利文獻CN1454896A公開了一種葡萄籽低聚原花青素的提取方法，該方法首先是將葡萄籽進行粉碎、過篩、脫脂，再經含無機礦酸的有機溶劑提取、過濾、無機堿中和、過濾、減壓濃縮后即可得到原花青素粗提物，再將粗提物中加入石油醚或三氯甲烷，放置、過濾、干燥得到精制原花青素；雖然該發明能夠得到低聚原花青素，但該發明沒有對復雜的原花青素組分進行分離，得到的原青花素聚合度不夠均一，且雖是低聚原花青素，但聚合度還是偏高，且產率較低。又如，中國專利文獻CN102690858A公開一種葡萄籽原花青素的制備方法，首先制備康寧木霉和黑曲霉直投式發酵劑，然后將葡萄籽經加水磨漿、加葡萄糖配料、高溫滅菌、接菌發酵、離心除渣、超濾提取、干燥等工藝制成葡萄籽原花青素；但該發明發酵劑的制備步驟繁瑣，成本較高，最后得到的原花青素聚合度不均一。

發明內容

針對現有技術存在的問題，為提高原花青素聚合度的均一性，降低平均聚合度，本發明提供一種均一組分低聚原花青素的制備方法；本發明方法得到的低聚原花青素純度高、產率高、聚合度均一、平均聚合度較小。

本發明的技術方案如下：

一種均一組分低聚原花青素的制備方法，包括步驟：

(1)將經滅菌的含有原花青素的物料粉末加入水中，混合均勻得混合物；然后接種微生物進行發酵得發酵物料；所述微生物為米曲霉(Aspergillus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)、黑曲霉、根霉或白腐真菌中的一種或兩種以上的組合；