[發明專利]一種檢測飼料中糖含量的方法

在審

• 申請號: 201711375648.7
• 申請日: 2017-12-19
• 公開（公告）號: CN107831127A
• 公開（公告）日: 2018-03-23
• 發明（設計）人: 張萍
• 申請（專利權）人: 咸陽師范學院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙)61223
• 代理人: 韓曉娟

技術領域

本發明屬于糖含量檢測方法技術領域，具體涉及一種檢測飼料中糖含量的方法。

背景技術

糖含量的測定是飼料行業的重要生產監控指標，對飼料品質監控具有重要意義。一般情況下糖含量檢測包括總糖檢測和還原糖檢測。其中，還原糖的測定主要采用的是斐林試劑法。

總糖的測定包括轉化滴定法、蒽酮比色法和色譜法，其中，轉化滴定法主要測的是飼料中的還原糖和蔗糖的總量，總糖的測定以還原糖的測定法為基礎，將飼料中的二糖經酸水解還原成單糖，再按照還原糖測定法進行測定，測出的糖含量也以轉化糖的含量計。但是，該方法測量出的總糖主要指的是蔗糖和還原性糖含量的總和。而飼料一般是多種物質的混合物，其中含有甘油淀粉、糖類、脂肪等多種物質，糖類組分也不局限于蔗糖和還原性糖，所以上述總糖的轉化滴定法檢測手段難以準確表征飼料中的總糖含量。色譜法則是借助液相色譜儀或者氣相色譜儀，成本高，前處理工作繁雜，耗時長，且一次性只能分析單糖組分，不利于普及和推廣使用。蒽酮比色法的檢測限在30μg左右，采樣量較少，但由于不同的糖類與蒽酮試劑的顯色深淺程度不同，果糖顯色最深，葡萄糖次之，五碳糖顯色更淺，現有方法均是采用葡萄糖制作標準曲線，故測定糖的混合物時，會因為不同糖類的比例不同造成誤差。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供的一種檢測飼料中糖含量的方法，采用改進的糖含量提取方法和檢測方法，可以提高飼料中總糖和還原糖測定的準確度，降低檢測限，且不需要昂貴的色譜儀，前處理工作簡單，成本低。

本發明目的是提供一種檢測飼料中糖含量的方法，包括以下步驟：

S1，樣品前處理：取1-2g飼料樣品研磨成粉末狀，用乙醚淋洗2-3次，40-45℃水浴5-10min，加50mL水，研磨成漿，40-45℃水浴20-30min，冷卻至室溫，過濾，收集濾液并定容至100mL，稀釋，得到預處理樣品，備用；

S2，標準曲線的繪制：將葡萄糖、半乳糖、戊糖混合后溶于水中，配制葡萄糖-半乳糖-戊糖標準溶液；

將葡萄糖-半乳糖-戊糖標準溶液稀釋成不同濃度的稀釋液，分別取上述不同濃度的稀釋液1mL置于不同的具塞試管中，每個具塞試管中均依次加入0.5mL蒽酮試劑和5.0mL濃硫酸，混勻，打開試管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷卻至室溫，在620nm波長下測量OD值，以葡萄糖-半乳糖-戊糖標準溶液稀釋液中的糖含量為橫坐標，以OD值為縱坐標，繪制葡萄糖-半乳糖-戊糖標準溶液標準曲線L；

S3，樣品中總糖的測定和計算：分別取S1中所得的預處理樣品和蒸餾水各1mL，放入不同的具塞試管中，每個具塞試管依次加入蒽酮試劑0.5mL，濃硫酸5mL，混勻，打開試管塞，置于沸水浴中10min，取出后冷卻至室溫，在620nm波長下測量OD值，將所測的OD值帶入標準曲線L中，計算出預處理樣品中總糖含量C，按照公式(1)計算原始的飼料樣品中總糖含量；

W＝C×N×100/M(1)

公式(1)中，W表示飼料樣品中總糖含量；C表示預處理樣品中總糖含量；N表示稀釋倍數；M表示飼料樣品質量。

優選的，上述的檢測飼料中糖含量的方法，S1中，水浴溫度為40℃。

優選的，上述的檢測飼料中糖含量的方法，S2中，所述戊糖為木糖或者阿拉伯糖。

優選的，上述的檢測飼料中糖含量的方法，S2中，葡萄糖-半乳糖-戊糖標準溶液中葡萄糖、半乳糖和戊糖的質量比例為4:1:1，葡萄糖-半乳糖-戊糖標準溶液中糖含量的總濃度為200μg/mL。

優選的，上述的檢測飼料中糖含量的方法，還包括還原糖測定步驟：將S1得到的預處理樣品采用斐林試劑法測定并計算原始飼料樣品中的還原糖含量。

與現有技術相比，本發明提供的一種檢測飼料中糖含量的方法，具有以下

有益效果：

1、當總糖濃度≥100μg/100mL時，各個方法均能較好的反應溶液中真實總糖含量，誤差在2％以內。但是，當總糖濃度50μg/100mL時，沸水浴預處理樣品方法的誤差達到20％；常規蒽酮-硫酸法在5μg/100mL濃度溶液的測量上存在較大誤差，沸水浴預處理樣品方法無法檢測出5μg/100mL濃度，說明這兩種方法的靈敏度不如本發明的方法。沸水浴預處理樣品方法的與真實溶液濃度誤差最大，是因為該方法在預處理過程中，采用的水浴溫度是100℃，淀粉糊化成膠狀，導致蒽酮試劑無法與糖類成分充分反應，因此低濃度糖含量測量時誤差較大。