[發明專利]HPLC測定中藥退黃外洗液中甘草苷含量的方法

在審

• 申請號: 201711369907.5
• 申請日: 2017-12-19
• 公開（公告）號: CN108020622A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發明（設計）人: 張云平;陳啟釗;梁劍鋒
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種HPLC測定中藥退黃外洗液中甘草苷含量的方法，包括以下步驟：(1)制備對照品溶液：取甘草苷對照品與甲醇制成對照品溶液；(2)制備待測樣品溶液：精密取中藥退黃外洗液樣品加甲醇稀釋，制得待測樣品溶液；(3)取對照品溶液注入高效液相色譜儀測定，建立甘草苷標準曲線；(4)取待測樣品溶液注入高效液相色譜儀測定，獲得甘草苷的峰面積，從而根據標準曲線計算獲得甘草苷含量；所述步驟(3)和(4)的色譜條件：250mm×4.6mm，5μm Agilent TC?C18柱；流動相：甲醇?水＝30:70；流速1.0ml·min?1；波長切換：0～14分鐘238nm，14～30分鐘280nm，柱溫：30℃，進樣量2μl。本發明提供的方法操作簡單，高效省時，鑒定結果客觀準確。

技術領域

本發明涉及測定中藥退黃外洗液中甘草苷含量的方法，尤其涉及一種HPLC測定中藥退黃外洗液中甘草苷含量的方法。

背景技術

中藥退黃外洗液是由梔子、茵陳、大黃、柴胡、枳殼等16種中藥組成。具有行氣解郁，利膽退黃功效，主要用于預防和治療新生兒黃疸，黃疸性肝炎等疾病。該藥用于臨床療效較好。

發明內容

本發明的目的旨在提供一種HPLC測定中藥退黃外洗液中甘草苷含量的方法。

本發明的目的通過以下技術方案來實現：一種HPLC測定中藥退黃外洗液中甘草苷含量的方法，包括以下步驟：

(1)制備對照品溶液：取甘草苷對照品與甲醇制成對照品溶液；

(2)制備待測樣品溶液：精密取中藥退黃外洗液樣品加甲醇稀釋，制得待測樣品溶液；

(3)取對照品溶液注入高效液相色譜儀測定，建立甘草苷標準曲線；

(4)取待測樣品溶液注入高效液相色譜儀測定，獲得甘草苷的峰面積，從而根據標準曲線計算獲得甘草苷含量；

所述步驟(3)和(4)的色譜條件：250mm×4.6mm，5μm Agilent TC-C18柱；流動相：甲醇-水＝30:70；流速1.0ml·min-1；波長切換：0～14分鐘238nm，14～30分鐘280nm，柱溫：30℃，進樣量2μl。

所述步驟(1)中，精密稱取甘草苷5.30mg置50量瓶中加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，精密吸取對照品儲備液1ml置10ml瓶中加甲醇稀釋至刻度，作為對照品溶液。

所述步驟(2)中，精密量取中藥退黃外洗液樣品1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度,搖勻，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得待測樣品溶液。

與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：

與現有技術相比，本發明提供的方法操作簡單，高效省時，鑒定結果客觀準確。

具體實施方式

實施例1

(1)制備對照品溶液：精密稱取甘草苷5.30mg置50量瓶中加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，精密吸取對照品儲備液1ml置10ml瓶中加甲醇稀釋至刻度，作為對照品溶液。

(2)制備待測樣品溶液：精密量取中藥退黃外洗液樣品1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度,搖勻，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得待測樣品溶液。

(3)精密吸取上述對照品溶液0.2、1、2、3、5μl注入安捷倫Agilent-1200高效液相色譜儀測定，以峰面積積分值為縱坐標(Y)，進樣量(ng)為橫坐標(X)繪制標準曲線，得甘草苷的回歸方程為：Y＝34.5X+8.95(r＝0.9997)。