[發明專利]金屬內核/碳殼層結構的納米顆粒提取循環腫瘤DNA的方法有效
| 申請號： | 201711367165.2 | 申請日： | 2017-12-18 |
| 公開（公告）號： | CN109929831B | 公開（公告）日： | 2023-01-20 |
| 發明（設計）人： | 梁鑫淼;李秀玲 | 申請（專利權）人： | 中國科學院大連化學物理研究所 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 沈陽晨創科技專利代理有限責任公司 21001 | 代理人： | 鄭虹 |
| 地址： | 116023 *** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 金屬 內核 碳殼層 結構 納米 顆粒 提取 循環 腫瘤 dna 方法 | ||
1.一種金屬內核/碳殼層結構的納米顆粒提取循環腫瘤DNA的方法，其特征在于采用分散固相萃取模式，具體步驟如下：
1)先采用上樣液平衡DNA富集材料，將該DNA富集材料與生物樣品以質量比為100-1000:1混合，孵化0.5分鐘-12小時，過濾或者離心分離，棄上混合層清液，收集沉淀；
2)采用pH 1-6清洗液與沉淀混合，孵化0.5分鐘-60分鐘，，過濾或者離心分離，棄上層清液，收集沉淀；
3)采用pH 8-13洗脫液與沉淀混合，孵化0.5分鐘-60分鐘，過濾或者離心分離，收集上清液，得ctDNA；
上述整個過程在10-60℃進行，
所述DNA富集材料為金屬內核/碳殼層結構的納米顆粒材料；
所述上樣液為有機溶劑、有機酸和水的混合液，有機溶劑為乙腈、甲醇或乙醇，有機酸為甲酸、乙酸或三氟乙酸，有機溶劑體積濃度為50-90％，pH＝1-6；
所述清洗液為有機溶劑、有機酸和水的混合液，有機溶劑為乙腈、甲醇或乙醇，有機酸為甲酸、乙酸或三氟乙酸，有機溶劑體積濃度為50-90％，pH＝1-6；
所述洗脫液為有機溶劑、有機堿和水的混合液，有機溶劑為乙腈、甲醇或乙醇，有機堿為氨水或三乙胺，有機溶劑體積濃度為10-50％，pH＝8-13；所述金屬內核/碳殼層結構的納米顆粒材料，其內核為金屬納米顆粒，其外殼的結構式為如下所示：
2.根據權利要求1所述的一種金屬內核/碳殼層結構的納米顆粒提取循環腫瘤DNA的方法，其特征在于所述金屬為Ag,Ti,Fe,Ga,Ni,Au,Pd或Pt。
3.根據權利要求1所述的一種金屬內核/碳殼層結構的納米顆粒提取循環提取腫瘤DNA的方法，其特征在于所述生物樣品為血液、滑膜液、腦脊液或尿液。
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