[發(fā)明專利]青梅中白藜蘆醇類化合物的提取方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711366188.1
• 申請(qǐng)日: 2017-12-18
• 公開（公告）號(hào): CN108083988B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋小平;陳文豪;邵泰明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海南師范大學(xué);海南科技職業(yè)學(xué)院
• 主分類號(hào): C07C37/68
• 分類號(hào): C07C37/68;C07C39/17;C07D493/06;C07D307/93;A61P19/10
• 代理公司: 常州市江海陽光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32214
• 代理人: 陸文俊

本發(fā)明公開了一種青梅中白藜蘆醇類化合物的提取方法及其應(yīng)用，該白藜蘆醇類化合物的提取方法如下：將青梅組織經(jīng)過自然陰干、粉碎后用醇溶液冷浸提取，減壓濃縮后得浸膏，浸膏中加入蒸餾水懸浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取得各部位浸膏；乙酸乙酯浸膏經(jīng)柱層析、薄層層析、高效液相即得到白藜蘆醇類化合物。本發(fā)明從青梅中提取的白藜蘆醇類化合物具有較好的促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬植物化學(xué)醫(yī)藥技術(shù)域，具體涉及一種青梅中白藜蘆醇類化合物的制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

骨質(zhì)疏松(osteoporosis，OP)是各種原因引起的代謝性骨病，其發(fā)病機(jī)理比較復(fù)雜。其病變特點(diǎn)為骨量減少、骨微觀結(jié)構(gòu)退化、脆性加強(qiáng)和易發(fā)生骨折。多發(fā)于絕經(jīng)后婦女、老人。最新資料顯示因骨質(zhì)疏松導(dǎo)致髖關(guān)節(jié)骨折其1年內(nèi)病死率達(dá)20%，生存1年以上者約25%喪失活動(dòng)能力，為此全球都予以了普遍關(guān)注和重視。我國是世界上擁有骨質(zhì)疏松癥患者最多的國家，骨質(zhì)疏松率為15.7%，患者總?cè)藬?shù)超過9000萬。在我國70%–80%的中老年骨折是因骨質(zhì)疏松引起的，其中每年新發(fā)椎體骨折約有181萬人，髖部骨折病例為23萬。如何有效預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松已成為全球共同關(guān)注的問題。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為骨質(zhì)疏松的基本病理機(jī)制是在骨代謝過程中骨吸收和骨形成的偶聯(lián)出現(xiàn)了失衡，導(dǎo)致人體內(nèi)的鈣磷代謝不平衡，骨密度逐漸減少而引發(fā)的臨床癥狀。由于西醫(yī)對(duì)OP的病因缺乏明確的認(rèn)識(shí)，用藥針對(duì)性不強(qiáng)，且用藥時(shí)間長(zhǎng)、副作用大、禁忌癥多，藥價(jià)昂貴等問題，現(xiàn)在人們關(guān)注的熱點(diǎn)轉(zhuǎn)向從天然產(chǎn)物中尋找具有治療骨質(zhì)疏松的有效藥物、單體化合物成分及其有效部位上。

青梅(Vatica mangachapoi)為龍腦香科青梅屬植物，喬木，樹高約20米。小枝被星狀絨毛。葉片革質(zhì)，長(zhǎng)圓形至長(zhǎng)圓狀披針形，先端漸尖或短尖，基部圓形或楔形，兩面均突起，網(wǎng)脈明顯，葉柄密被灰黃色短絨毛。圓錐花序頂生或腋生，花萼裂片鑷合狀排列，卵狀披針形或長(zhǎng)圓形，兩面密被星狀毛或鱗片狀毛；花瓣白色，有時(shí)為淡黃色或淡紅色，芳香，長(zhǎng)圓形或線狀匙形，花絲短，花藥長(zhǎng)圓形，子房球形，密被短絨毛，果實(shí)球形；5-6月花期，8-9月果期。我國主產(chǎn)海南，生于海拔700米以下的丘陵、坡地林中。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，目前青梅在治療骨質(zhì)疏松上的應(yīng)用尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于解決上述問題，提供一種來源于青梅的白藜蘆醇類化合物的制備方法及應(yīng)用。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是：一種青梅中白藜蘆醇化合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

①將青梅根、莖、葉或果陰干粉碎后用乙醇冷浸提取，將收集到的回流液合并、減壓蒸餾，得到乙醇總浸膏，然后將上述乙醇總浸膏均勻分散于蒸餾水中，依次用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得到石油醚部位浸膏和乙酸乙酯部位浸膏，依次加入與蒸餾水體積比為1:1的石油醚萃取至上層溶液顏色明顯變淺，加入與蒸餾水體積比為1:1的氯仿萃取3次，最后加入與蒸餾水體積比為1:1的乙酸乙酯萃取至上層溶液顏色幾乎無色，分別減壓濃縮萃取液，得石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位浸膏；

②將乙酸乙酯部位浸膏經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯（100:0-0:100，v/v）梯度洗脫，收集50%乙酸乙酯組分再用石油醚-乙酸乙酯體積比為3:1的洗脫劑進(jìn)行硅膠柱層析，得到3個(gè)目標(biāo)組分Fr.1-3；

③將步驟②中的3個(gè)目標(biāo)組分Fr.1-3分別采用高效液相色譜分離，得到白藜蘆醇類化合物。

上述步驟③中的Fr.1組分的高效液相色譜分離條件為：40%乙腈，60% 水，3ml/min流速；Fr.2組分的高效液相色譜分離條件為：35%乙腈，65% 水，3ml/min流速；Fr.3組分的高效液相色譜分離條件為：33%乙腈，67% 水，3ml/min流速。

上述青梅中白藜蘆醇類化合物的應(yīng)用為對(duì)于抗骨質(zhì)疏松活性上的應(yīng)用。

所述的抗骨質(zhì)疏松活性測(cè)試細(xì)胞為MC3T3-E1 Subclone 14 (小鼠原成骨細(xì)胞)。