[發明專利]一種修復高濃度石油污染鹽堿土壤的方法

有效

• 申請號: 201711364798.8
• 申請日: 2017-12-18
• 公開（公告）號: CN108160702B
• 公開（公告）日: 2020-02-21
• 發明（設計）人: 李鳳梅;郭書海;王卅;吳波;李剛;張玲妍
• 申請（專利權）人: 中國科學院沈陽應用生態研究所
• 主分類號: B09C1/10
• 分類號: B09C1/10;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎;周秀梅

本發明屬于環境有機污染土壤生物修復技術領域，具體涉及一種修復高濃度石油污染鹽堿土壤的方法。將適合電場條件的考克氏菌屬(Kocuriasp.)FB6接種至待處理高濃度石油污染鹽堿土壤中，而后對土壤施加1.0?3.0V/cm的電場強度，進而實現對土壤的修復。采用本發明的方法30天時去除率達到55.7?66.4％，具有較好的應用前景，可用于高濃度石油污染鹽堿土壤修復。

技術領域

本發明屬于環境有機污染土壤生物修復技術領域，具體涉及一種修復高濃度石油污染鹽堿土壤的方法。

背景技術

土壤石油污染是世界各國普遍關注的環境問題，微生物降解是修復石油污染土壤的一種經濟、有效、環保的方法，是石油烴類有機污染物去除的主要機制。石油降解菌是指從受石油污染的環境中篩選、分離出的一類具備分解礦化石油烴能力的微生物，在石油污染的生物修復中具有重要作用。然而，土壤的石油污染常伴隨著高鹽環境，高污染及高濃度鹽離子嚴重制約石油烴降解菌的生長及其對于石油烴的代謝能力，傳統的非耐鹽微生物并不適合對污染的高鹽環境進行生物修復。因此，建立一種新的高石油污染鹽堿土壤的修復方法是修復石油污染鹽漬化土壤的首要前提。

近年來，研究者在篩選時往往通過控制不同的條件得到降解能力與耐受不同環境能力的菌株。已有研究者從自然環境中分離篩選得到既耐鹽又高效降解石油污染物的耐鹽菌：Candida sp.、 Halomonasorganivorans、Pseudomonas aeruginosa、Penicilliumchrysogenum、Polymorphumgilvum、Halomonascampisalis、Panoeaagglomerans、Porticoccushydrocarbonoclasticus、 Yarrowialipolytica、Thalassobacillusdevorans、Haloarcula sp.、 Bacillus subtilis等。其中，研究者在實驗室研究中測得某些菌的耐鹽能力最大耐鹽度為8％，原油的降解率達到70％以上。但在實際應用中，污染物性質和濃度會影響微生物的降解，生物降解存在效率低等問題。因此，為了提高土壤中污染物的生物降解效率，彌補生物修復方法不足，需要與其它技術聯合。

發明內容

本發明的目的在于提供一種修復高濃度石油污染鹽堿土壤的方法。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：

一種修復高濃度石油污染鹽堿土壤的方法，將考克氏菌屬 (Kocuria sp.FB6)FB6接種至待處理石油污染鹽堿土壤中，而后對土壤施加 1.0-3.0V/cm的電場強度，進而實現對土壤的修復。

所述適合電場條件且耐鹽的考克氏菌屬(Kocuria sp.FB6)FB6，已于2013 年8月2日保藏于中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC No:M 2013360。

所述適合電場條件且耐鹽的考克氏菌屬(Kocuria sp.FB6)FB6CCTCC No：M2013360為革蘭氏染色為陽性，細胞為球狀，大小為2-2.5μm，分散排列，無芽孢，為好氧細菌。可生長pH范圍為6.5-8.5，最適生長pH為 7.0；可生長溫度范圍為15-35℃，最適生長溫度是25-30℃；菌落圓形，橘黃色。

所述適合電場條件且耐鹽的考克氏菌屬(Kocuria sp.FB6)FB6菌懸液按 0.5--2.0％(質量比)施入土壤中。

所述適合電場條件且耐鹽的考克氏菌屬(Kocuria sp.FB6)FB6按 0.5-1.0％的接種量接種于牛肉膏蛋白胨液體培養基中，培養至對數生長期，離心收集菌體，菌體經稀釋至濃度為10⁸-10⁹cfu/ml菌懸液。

所述稀釋成菌懸液時可采用磷酸鹽緩沖液稀釋，其中，磷酸鹽緩沖液稀釋液為經水稀釋的磷酸鹽緩沖液。