[發明專利]一種ASE-HPLC法測定仙茅中仙茅苷含量的方法

在審

• 申請號: 201711364251.8
• 申請日: 2017-12-18
• 公開（公告）號: CN108169350A
• 公開（公告）日: 2018-06-15
• 發明（設計）人: 陳學松;韋日偉;歐妮
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種ASE?HPLC法測定仙茅中仙茅苷含量的方法，屬于化學檢測領域。旨在提供一種提取效果好且檢測精度高的方法，該方法采用ASE法用甲醇萃取仙茅粉末，并收集甲醇萃取液；采用HPLC法測定甲醇萃取液中的仙茅苷含量，其中，采用的流動相為乙腈?0.1％磷酸。本發明可替代藥典方法對仙茅中的仙茅苷進行含量測定以及質量控制。

技術領域

本發明屬于化學檢測領域，尤其是一種ASE-HPLC法測定仙茅中仙茅苷含量的方法。

背景技術

2015年藥典記錄了取本品粉末(過三號篩)約1g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流2小時，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液20ml，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

液相色譜檢測條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1％磷酸溶液(21：79)為流動相；檢測波長為285nm。理論板數按仙茅苷峰計算應不低于3000。

藥典的方法操作過程復雜，對操作人員的操作技能要求高。

發明內容

針對上述不足，本發明旨在提供一種ASE-HPLC法測定仙茅中仙茅苷含量的方法，該方法將ASE萃取與HPLC檢測進行結合，并將藥典方法中流動相的體積比進行了優化，以達到更好的實驗效果。

為了實現上述技術效果，本發明提供的技術方案是這樣的：一種ASE-HPLC法測定仙茅中仙茅苷含量的方法，依次包括下述步驟：

步驟1：采用ASE法用甲醇萃取仙茅粉末，并收集甲醇萃取液；

步驟2：采用HPLC法測定甲醇萃取液中的仙茅苷含量，其中，采用的流動相為乙腈-0.1％磷酸。

優選地，所述的步驟1具體包括下述子步驟：

步驟S1：將仙茅樣品粉碎，過三號篩，取1g與1g硅藻土混合；

步驟S2：將步驟1所得的混合物裝于放有濾膜的10ml ASE萃取池中，加硅藻土至與池口平行；

步驟S3：用甲醇萃取，萃取結束后，用甲醇將萃取液定容至50ml，在15000r/min下離心5min，取上清液。

優選地，步驟S3所述的萃取參數為：溫度為85℃，時間為5min，次數為2次，沖洗體積為100％，吹掃時間為60s。

優選地，步驟2所述的HPLC法的檢測參數為：色譜柱為Thermo Syncronis C18，3*100mm，3μm；柱溫為40℃；流速為0.5mL/min；流動相為體積比等于15：86的乙腈-0.1％磷酸；檢測波長為285nm。

本發明與傳統方法相比，具有以下優點：

1、本發明提高了溫度降低溶劑的黏度，減少了溶劑進入樣品基體的阻止，增加了溶劑進入樣品基體的擴散，降低溶劑和樣品基體之間的表面張力，使溶劑溶解待測物的容量增加；

2、由于液體對溶質的溶解能力遠大于氣體對溶質的溶解能力，故萃取液體的沸點隨壓力升高而提高，從而使溶劑在高溫高壓下仍保持在液態。

3、采用本發明所述的檢測方法測定仙茅苷對照品在0.0102～0.0612μg范圍內呈良好的線性關系；

4、本發明所述的ASE提取方法重復性良好；

5、本發明考察了甲醇、乙酸乙酯、乙醇，以提取率高低、雜質多少為依據選出較佳溶劑，結果顯示甲醇提取率最高，依次到乙醇、乙酸乙酯；乙醇提取率高于藥典，但峰型差；乙酸乙酯萃取液需蒸干定容后才能測定，操作較為繁瑣；所以選擇甲醇作為提取溶劑；