[發(fā)明專(zhuān)利]一種飲料中專(zhuān)利藍(lán)V的SER快速檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711362627.1
• 申請(qǐng)日: 2017-12-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108037109A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-05-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張書(shū)敏;江龍發(fā);耿響;郭平
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江西省檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/65
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/65
• 代理公司: 長(zhǎng)沙市標(biāo)致專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 43218
• 代理人: 曹花

1.一種飲料中專(zhuān)利藍(lán)V的SER快速檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）金納米增強(qiáng)基底的制備；

（2）篩選電解質(zhì)：對(duì)影響待測(cè)物拉曼信號(hào)的電解質(zhì)進(jìn)行比較，取拉曼信號(hào)增強(qiáng)較大的無(wú)機(jī)鹽為實(shí)驗(yàn)條件；

（3）制作拉曼譜峰標(biāo)準(zhǔn)線：利用步驟（1）所制備的基底，著色劑標(biāo)準(zhǔn)溶液及其步驟（2）中電解質(zhì)按體積比為10:1:2混合均勻，用于SERS檢測(cè)，其檢測(cè)所得拉曼譜峰與高斯模擬理論峰進(jìn)行對(duì)比，并對(duì)其譜峰進(jìn)行歸屬；

（4）除去飲料中的酒精、二氧化碳等易揮發(fā)成分；

（5）以市售不含待測(cè)物的若干種飲料為空白樣品，由步驟（4）除去易揮發(fā)物質(zhì)提取，分別配制以空白飲料基質(zhì)的梯度濃度的著色劑溶液取50μL的上述待測(cè)液、步驟（1）制備的500μL金溶膠基底和100μL步驟（2）所得電解質(zhì)溶液，三者混合均勻后，用于拉曼光譜檢測(cè)；

（6）將步驟（5）所得的待測(cè)液的SERS譜圖與步驟（3）中待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)溶液SERS和其理論計(jì)算譜圖的拉曼譜峰進(jìn)行對(duì)比，便可確定待測(cè)試樣中是否含有該種色素，即可完成待測(cè)飲料中是否含有該種色素的定性判別；

（7）將步驟（6）所測(cè)得的若干種待測(cè)飲料的SERS譜圖與步驟（3）所歸屬的色素拉曼譜峰進(jìn)行比較，選擇拉曼峰強(qiáng)度較高且峰型好的著色劑特征峰用于飲料中著色劑的定量分析；以待測(cè)物濃度為橫坐標(biāo)，特征峰的峰強(qiáng)度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，此標(biāo)準(zhǔn)曲線用于飲料試樣中色素的半定量分析。

2.如權(quán)利要求1所述飲料中專(zhuān)利藍(lán)V的SER快速檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟（1）金納米增強(qiáng)基底的制備，采用檸檬酸三鈉加熱還原法制備得到，按照下述步驟進(jìn)行：為了提高基底的增強(qiáng)效果，以下同時(shí)制備了三種金膠基底；（1）把三口瓶放于智能恒溫磁力攪拌器中，向三口瓶加入100 mL氯金酸溶液（1%），加熱至沸騰（邊加熱邊攪拌），快速加入3.8 mL檸檬酸三鈉溶液，保持?jǐn)嚢枥^續(xù)加熱15 min；（2）向三口瓶加入100 mL氯金酸溶液（0.01%），加熱至沸騰（邊加熱邊攪拌），快速加入0.75 mL檸檬酸三鈉溶液，保持?jǐn)嚢枥^續(xù)加熱5 min；（3）向三口瓶加入5ml IP6與 100 mL氯金酸溶液（0.01%），加熱至沸騰（邊加熱邊攪拌），快速加入1 mL檸檬酸三鈉溶液，保持?jǐn)嚢枥^續(xù)加熱5 min，三種方法所得金溶膠靜置冷卻、低溫保存。

3.如權(quán)利要求1或2所述飲料中專(zhuān)利藍(lán)V的SER快速檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟（2）著色劑的表面增強(qiáng)拉曼散射條件優(yōu)化：取步驟（1）制備的表面增強(qiáng)基底500 μL，加標(biāo)濃度為11.94 mg/kg飲料50 μL，電解質(zhì)氯化鈉和氯化鎂分別取100 μL，放于2mL石英瓶中，混合均勻，進(jìn)行拉曼光譜檢測(cè)，選取增強(qiáng)效果較好的無(wú)機(jī)鹽作為實(shí)驗(yàn)條件。

4.如權(quán)利要求1或2所述飲料中專(zhuān)利藍(lán)V的SER快速檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟（3）制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)液50μL、步驟（1）制備的500μL增強(qiáng)基底溶液和100μL電解質(zhì)溶液（1%）混合均勻后，用于拉曼光譜檢測(cè)；通過(guò)Gaussian 03W軟件優(yōu)化計(jì)算出該色素的理論拉曼峰，并通過(guò)Gauss View查看計(jì)算結(jié)果，依據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)和書(shū)籍，對(duì)比理論計(jì)算和實(shí)驗(yàn)拉曼譜峰，分析兩者其存在差異的原因，并對(duì)色素分子的各特征振動(dòng)頻率進(jìn)行官能團(tuán)的譜峰歸屬和解析，得到著色劑分子的特征譜峰，這些特征譜峰作為各種飲料中該著色劑的定性定量判別依據(jù)。

5.如權(quán)利要求1或2所述飲料中專(zhuān)利藍(lán)V的SER快速檢測(cè)方法，其特征在于，所述步驟（4）中對(duì)含有酒精或者二氧化碳等易揮發(fā)物質(zhì)的飲料，采用微波處理2分鐘后，稱(chēng)其所減少的質(zhì)量，并折算至最終待測(cè)物含量計(jì)算中。