[發明專利]一種用樹脂吸附與超濾膜純化結合法提取豬小腸粘膜中的肝素鈉的方法

在審

• 申請號: 201711353171.2
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN109929058A
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發明（設計）人: 劉乃山;遲培升;姜德志
• 申請（專利權）人: 青島九龍生物醫藥集團有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一種能夠從豬小腸粘膜中提取肝素鈉的方法，它先使用樹脂將豬小腸粘膜中的肝素鈉提取出來，再使用超濾膜對其進一步提純，經過吸附、洗滌與洗脫、超濾膜純化、脫水四個步驟從豬小腸粘膜中提取肝素鈉。結果此法與傳統提取方法相比較，需要乙醇少，成本低，效價和收率都有明顯提高。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，屬于從豬小腸粘膜中提取肝素鈉的方法。

背景技術

肝素鈉是一種生化藥品，其從豬小腸粘膜中提取，其在手術中起著不可替代的作用，挽救了無數生命，是醫界不能斷檔藥品。

自上個世紀四十年代以來，肝素鈉被用于臨床，應用范圍不斷擴大。特別自上個世紀九十年開始，在臨床中肝素鈉被廣泛用于：防治血栓栓塞性疾病，輔助治療尿毒癥，心血管病，血液病等大量疾病。進入七十年代以后，肝素鈉生產工藝，在我國得到不斷改進提高，使我國成為最大的肝素鈉產銷國家，目前國際市場上70%以上肝素鈉產品出產于中國。目前，肝素鈉生產廠家主要采用鹽解——離子交換——乙醇沉淀法從豬小腸粘膜中提取肝素鈉粗品，該方法成本高，收率和效價低。所以，本公司開發了樹脂吸附與超濾膜純化結合法從豬小腸粘膜中提取肝素鈉粗品，以降低成本，提高效益。

發明內容

本發明提供了一種全新的樹脂吸附與超濾膜純化結合法提取豬小腸粘膜中的肝素鈉，能夠有效地降低成本，并提高肝素鈉粗品的收率和效價。

為此，本發明通過以下技術方案予以實現：

1、吸附

稱取一定質量的豬小腸黏膜，置反應罐中，加1倍質量純化水稀釋，用30％的氫氧化鈉溶液調節pH 值至9.0～9.5，加熱至沸騰，保持10～15分鐘，撈去液體上的雜物。緩慢降溫至35 ℃～45 ℃，用在出水口處系有一100目尼龍布袋的耐高溫的塑料軟管將液體虹吸至反應池中，調節食鹽波美度為3.2～3.5，PH值為8.0，按反應池中液體量加入4％～8％的D204肝素鈉專用樹脂，保溫攪拌吸附8～10小時。

2、洗滌與洗脫

吸附完畢后，靜置30分鐘，過濾，收集樹脂，并用純化水將樹脂漂洗干凈，瀝干，加入1.2mol/L 氯化鈉溶液洗滌2小時，瀝干后，加入4 mol/L 氯化鈉溶液1倍量，攪拌洗脫5小時，瀝干后再洗脫2次，每次加入4 mol/L 氯化鈉溶液的量減半，洗脫時間分別為2小時和1小時。合并全部洗脫液。

3、超濾膜純化

用45nm孔徑的管型聚丙烯腈超濾膜過濾上步得到的洗脫液，設定洗脫液的透過速度為60L/h·m2～90L/h·m2，同時加場強為1400V/m～1600V/m的直流電場（方向與溶液流動的方向一致）和頻率為60000Hz～70000Hz的超聲波場（功率為430瓦），棄掉濾液，所得到的糊狀物即為較高純度的肝素鈉。

4、脫水：

按比例在糊狀物中加入3倍95％的乙醇，充分攪拌后，靜置12小時以上，虹吸上層乙醇，再真空干燥，得肝素鈉粗品。

本發明的有益效果是：在乙醇沉淀之前，先用聚丙烯腈膜進行超濾純化。有效地降低了乙醇的使用量，并且提高了效價與收率。

四、具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步說明。

（一）實施例一：

1、吸附

稱取50.0千克的豬小腸黏膜，置于反應罐中，加純化水50.0千克，用30％的氫氧化鈉溶液調節pH 值至9.3，加熱至沸騰，保持14分鐘，同時撈去液體上的雜物。緩慢降溫至43℃，用在出水口處系有一100目尼龍布袋的耐高溫的塑料軟管將液體虹吸至反應池中，調節氯化鈉波美度為3.3，PH值為8.0，按反應池中液體量加入5％的D204肝素鈉專用樹脂，保溫攪拌吸附9小時22分鐘。