[發明專利]一種八珍湯配方顆粒的質量檢測方法

在審

• 申請號: 201711351716.6
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN108169403A
• 公開（公告）日: 2018-06-15
• 發明（設計）人: 霍文杰;丁青;官永河;朱德全;陳萬發
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/02
• 代理公司: 廣州致信偉盛知識產權代理有限公司 44253
• 代理人: 彭玲

1.一種八珍湯配方顆粒的質量檢測方法，其特征在于，包括薄層色譜定性鑒別和含量檢測：

（1）人參的薄層色譜定性鑒別：

取本品6g，研細，加甲醇50ml，加熱回流1-2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水5ml使溶解，加水飽和的正丁醇50ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液每次加濃氨水50ml氨洗，氨洗2-4次，分取正丁醇層，合并，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參對照藥材3g，加水50ml，煮沸20-40分鐘，濃縮至近干，加甲醇50ml，同法制成對照藥材溶液；取人參皂苷Rb1對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rg1對照品及人參皂苷Rf對照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照藥材溶液10μl及對照品溶液2μl分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水=15：40：22：10于10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，分別顯相同顏色的熒光斑點；

（2）白芍的薄層色譜定性鑒別：

取本品2g，研細，加甲醇50ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，濾過，濾液用乙醚50ml提取，棄去乙醚液，水液用正丁醇50ml提取，分取正丁醇層，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇制1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB試驗，吸取上述供試品溶液2μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以體積比乙酸乙酯-甲醇-水=100∶17∶13為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%濃硫酸香草醛溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，于日光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

（3）炙甘草的薄層色譜定性鑒別：

取本品3g，研細，加7%的硫酸45%乙醇溶液50ml，加熱回流1-2小時，濾過，放冷，濾液加沸程60～90℃的石油醚振搖提取1-3次，每次20ml，收集石油醚液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草次酸對照品，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB試驗，吸取上述供試品溶液8μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比沸程30～60℃石油醚-甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸=10∶20∶7∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

（4）川芎、當歸的薄層色譜定性鑒別

取本品6g，研細，加1%碳酸氫鈉溶液50ml，超聲處理20-40分鐘，離心，取上清液用稀鹽酸調節pH值至2～3，用乙醚振搖提取1-3次，每次20ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對照品，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比環己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸=2.5:1:1:0.1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；再噴1%三氯化鐵和1%鐵氰化鉀按質量比為1∶1的混合液，日光下觀察；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

（5）含量測定：

采用高效液相色譜法進行測定，具體方法和步驟如下：

色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以

0.05%磷酸溶液為流動相B，按下表所示梯度洗脫；檢測波長為240nm，理論塔板數按芍藥苷峰計算應不低于2000；

對照品溶液的制備 取芍藥苷、阿魏酸及甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每1ml含芍藥苷、阿魏酸及甘草酸銨100μg、40μg、50μg的溶液，即得；

供試品溶液的制備 取本品1.0g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理15-20 分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。