[發明專利]地加瑞克關鍵四肽中間體的制備方法

有效

• 申請號: 201711351200.1
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN109929012B
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發明（設計）人: 張豐盈;周友雷;梅衛華;陳桂德;張曉瑜
• 申請（專利權）人: 連云港恒運藥業有限公司
• 主分類號: C07K7/23
• 分類號: C07K7/23;C07K1/02
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

本發明涉及地加瑞克關鍵四肽中間體的制備方法。N?乙酰?D?萘?2?丙酰胺?4?氯?D?苯丙氨酸和D?吡啶基??3?丙氨酰?L?絲氨酸芐酯三氟乙酸鹽經縮合、水解等步驟得到地加瑞克多肽片斷N?乙酰基?D?萘2?丙氨酰?4?氯?D?苯丙氨酰?D?吡啶基?3?丙氨酰?L?絲氨酸。本發明的制備方法能夠有效避免和除去多肽合成中的產生的雜質，高純度高收率的制備地加瑞克多肽片段。

技術領域

本發明涉及多肽合成領域，具體涉及一種用于制備十肽地加瑞克的關鍵四肽中間體的制備方法。

背景技術

前列腺癌是工業化世界中導致男性發病和死亡的主要原因。地加瑞克，也被稱為FE200486，是第三代促性腺激素釋放激素(GnRH)受體拮抗劑(GnRH阻滯劑)，其已經被開發并在最近被批準用于需要雄激素阻斷療法的前列腺癌患者。地加瑞克通過直接且競爭性阻滯腦垂體中的GnRH受體而起作用，并且與其他GnRH拮抗劑一樣，不會引起經由下丘腦-腦垂體-性腺軸的促黃體激素產生的初始刺激，并且因此不會引起睪酮激增或臨床爆發。

地加瑞克是一種合成的直鏈十肽，其含有七個非天然氨基酸，其中五個是D-氨基酸。在該十肽的主鏈中具有十個手性中心。在序列的位置5處的氨基酸殘基在側鏈取代中具有額外的手性中心，產生總共十一個手性中心。其CAS登記號是214766-78-6(游離堿)，并且其以商標Firmagon^TM可商購獲得。該藥物物質在化學上被命名為D-丙氨酰胺，N-乙酰基-3-(2-萘基)-D-丙氨酰-4-氯-D-苯丙氨酰-3-(3-吡啶基)-D-丙氨酰-L-絲氨酰-4-[[[(4S)-六氫-2，6-二氧代-4-嘧啶基]羰基]氨基]-L-苯丙氨酰-4-[(氨基羰基)氨基]-D-苯丙氨酰-L-亮氨酰-N6-(1-甲基乙基)-L-賴氨酰-L-脯氨酰-并且由以下化學結構表示：

地加瑞克的結構也可以表示為：Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-Hor)-D-4Aph(Cbm)-Leu-Lys(iPr)-Pro-D-Ala-NH₂。

CN102428097B報道了在地加瑞克的合成過程中，中間體Fmoc-4Aph(Hor)-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH-樹脂在堿性條件下脫保護的過程中發生部分重排而成為Fmoc-X-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH-樹脂，X為4-([2-(5-乙內酰脲基)]-乙酰基氨基)-苯丙氨酸。可以預見，由Fmoc-4Aph(Hor)-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH-樹脂得到的地加瑞克產物被相應量的Ac-D-2Nal-D-Phe(4Cl)-D-3Pal-Ser-X-D-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-A?la-NH₂污染。地加瑞克是給予人類的藥物的活性成分，因此其不能被任何含量超過產品的0.3重量％的雜質污染。因此，適合人類使用的地加瑞克中，乙內酰脲副產物的量不允許多于0.3重量％。因為包含乙內酰脲部分的副產物在結構上與地加瑞克非常相似，因此難以將它們分離。如果進行嘗試，則可以預見分離會導致產品的顯著損失。因此，在采用保護基Fmoc的藥物級地加瑞克的制造工藝中，應當避免堿性條件。

US5925730A報道了地加瑞克的合成中優選的α-氨基保護基是叔丁氧基羰基(Boc)。而且，還揭示了多種其它眾所周知的保護基，例如芴甲氧羰基(Fmoc)。Boc基團的優點在于，被其保護的α-氨基可在酸性條件下通過三氟乙酸(TFA)的標準處理解封閉。TFA的缺點在于，其對人類的毒性高，這使得制造人員處于危險之中。TFA的另一缺點在于，其對環境具有毒性，這導致其處置成本高，一旦處置不當就會污染環境。

輝凌在專利US5925730中最早采用了Boc固相合成策略，采用三氟乙酸脫除Boc保護基。雖然有效地避免乙內酰脲類似物雜質的產生，但Boc固相合成策略在肽樹脂裂解時需要采用HF，HF對人和環境有較大的危害，難以進行規模化生產。