[發明專利]一種具有ACE抑制活性和抗腫瘤的多肽分子及其制備方法

有效

• 申請號: 201711348063.6
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN108101960B
• 公開（公告）日: 2020-12-29
• 發明（設計）人: 王偉平;何雨峰;岳碩豪;張華山;張軍林;鄧穎
• 申請（專利權）人: 湖北工業大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/34;C12P21/02;A61K38/08;A61P35/00;A61P9/12;C12R1/66
• 代理公司: 武漢帥丞知識產權代理有限公司 42220
• 代理人: 朱必武

1.一種具有ACE抑制活性和抗腫瘤的多肽分子，其特征在于：該多肽分子為七肽氨基酸，其序列為天冬酰胺-蘇氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-蘇氨酸-組氨酸-脯氨酸。

2.權利要求1所述的一種具有ACE抑制活性和抗腫瘤的多肽分子在制備抗腫瘤藥品中的應用。

3.權利要求1所述的一種具有ACE抑制活性和抗腫瘤的多肽分子在制備治療或預防高血壓的藥品中的應用。

4.如權利要求1所述的具有ACE抑制活性和抗腫瘤的多肽分子的制備方法，其特征在于：通過下述技術方案予以實現：

方法A、真空冷凍干燥得到的紅曲霉菌絲體ACE抑制肽干粉使用濃度為10mmol/L，pH為7.3-7.5的PBS緩沖液進行復溶；對復溶后的ACE抑制肽溶液3000r/min條件下離心5min，收集上清液，使用0.22微米的水系微孔濾膜過濾處理，所得濾液采用使用GE公司superdex30pg葡聚糖凝膠柱層析分離，進樣量10mL，柱溫25℃，流動相為超純水，流速1mL/min，蛋白檢測波長為280nm；收集紅曲霉菌絲體ACE抑制肽活性組分峰，編號為組分A-E；

將具有最高的 ACE 抑制活性的組分E在3000r/min條件下離心5min，收集上清液，使用0.22微米的水系微孔濾膜過濾處理，所得濾液采用RP-HPLC進行進一步分離，分離條件為使用Shim-pack PRC-ODS色譜柱，進樣量10mL，柱溫25℃，流動相為超純水，流速5mL/min，蛋白檢測波長為220nm；收集組分E經RP-HPLC分離所得的活性組分峰，將各組分收集液冷凍干燥后，分離并收集凍干液中的具有最高的 ACE 抑制活性的組分E3，最后采用液相色譜-質譜聯用分析測定組分氨基酸序列，制得七肽產品；

方法B、按照固相合成法在2-氯三苯甲基樹脂上依次連接以芴甲氧羰?；鶠楸Ｗo基團的氨基酸，縮合劑為HBTU、DIEA；單個氨基酸的接肽時間為2h，脫保護劑為20%哌啶DMF，脫保護時間20min，獲得七肽化合物粗品，再經過反相C18柱分離純化，冷凍干燥，制得七肽產品；

所述以芴甲氧羰?；鶠楸Ｗo基團的氨基酸為Fmoc-L-Asn（trt）-OH，Fmoc-L-Met-OH，Fmoc-L-Thr（Tbu）-OH，Fmoc-L-His(Trt)-OH，Fmoc-L-Pro-OH。