[發明專利]一種分析注射用硫酸核糖霉素含量及有關物質的高效液相色譜電霧式檢測器法

在審

• 申請號: 201711343629.6
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN109900817A
• 公開（公告）日: 2019-06-18
• 發明（設計）人: 袁耀佐;趙恂;孫亞靈;張玫;趙述強
• 申請（專利權）人: 江蘇省食品藥品監督檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種分析注射用硫酸核糖霉素含量及有關物質的高效液相色譜電霧式檢測器法，該方法主要應用電霧式檢測器法對硫酸核糖霉素含量進行測定，對其有關物質進行檢查。對比已報道方法，該方法所用流動相組成簡單，分析成本低，對儀器及操作人員損害小，含量測定結果準確，重復性和回收率良好，且該方法經驗證可用于注射用硫酸核糖霉素含量測定及有關物質檢查。

技術領域

本發明屬于藥物分析技術領域，具體涉及硫酸核糖霉素的質量控制方法，尤其涉及一種注射用硫酸核糖霉素含量測定及有關物質檢查的方法。

背景技術

硫酸核糖霉素(Ribostamycin Sulfate)是日本明治制果株式會社于上世紀70年代研究開發的一種新型氨基糖苷類廣譜抗生素，商品名為維斯他霉素。1975年，中國科學院抗菌素研究所從廣東土壤中分離出一株核糖苷鏈霉菌(鏈霉菌3719)，并進行了菌種分類鑒定、化學分離與鑒別、發酵與提煉工藝、誘變育種、體內外活性及臨床前藥理等一系列實驗研究工作。1980年抗菌素所將誘變菌種D-318交予大連制藥廠和上海第四制藥廠，共同協作完成了注射用硫酸核糖霉素臨床樣品的制備及工藝試制研究并與1984年上市。

硫酸核糖霉素是核糖苷鏈霉菌產生的氨基糖苷類廣譜抗生素，對革蘭氏陽性、陰性菌均有抑制作用，對大腸桿菌屬、變形桿菌屬、沙門氏菌屬、肺炎桿菌和痢疾桿菌等革蘭氏陰性桿菌以及金葡菌較敏感，對結核桿菌具有一定敏感性，對綠膿桿菌和厭氧菌無效。用于各種呼吸道感染、尿路感染、腹腔感染、眼、耳、鼻、喉科及皮膚組織感染等，嚴重感染可與半合成青霉素、頭孢菌素聯合應用。同其他氨基糖苷類抗生素一樣具有抗菌譜廣和抗菌作用強的優點，此外，硫酸核糖霉素是內耳毒性和腎毒性較小的氨糖類抗生素之一。

由于硫酸核糖霉素無紫外吸收，現行各國藥典[日本藥典(JP17)、韓國藥典(第10版)、中國藥典(ChP2015)]均采用抗生素微生物檢定法測定硫酸核糖霉素的含量。該方法雖是經典的生物效價測定方法，但操作復雜、影響因素眾多，檢驗時間較長，不利于企業進行產品質量的中間控制和監管部門的對產品質量的快速監測。

因為硫酸核糖霉素無紫外吸收且其極性極強，所以ChP2015采用高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法(HPLC-ELSD)對其進行有關物質檢測。雖然比其他藥典的薄層色譜法專屬性強、靈敏度高，但是檢測用流動相所需試劑價格昂貴[取七氟丁酸酐45.1g，置1000ml量瓶中，加乙腈-四氫呋喃-水(10∶5∶85)]，具有強腐蝕性，對儀器、色譜柱、實驗人員都有一定的傷害，同時存在色譜條件優化空間小，濃度與峰面積呈對數線性計算較為復雜，靈敏度較低等問題。

高效液相電霧式檢測器法(HPLC-CAD)，其原理是出自HPLC的洗脫液進入電噴霧檢測器后先受氮氣作用在霧化室中霧化，再以較高流速撞擊到碰撞擋板上，撞擊后形成大小不同的外面包裹著錄東西的分析物顆粒液滴，較大的液滴在重力作用下由廢液管排出，較小的液滴則隨氮氣流入干燥管，揮發掉表明溶劑。同時，入口氮氣的另一流路則通過電暈裝置(內置高壓鉑金電極)形成帶正電荷的氮氣粒子，與干燥后的溶質顆粒在碰撞室中發生碰撞，碰撞過程中正電荷轉移到顆粒的外表面，顆粒表面積越大，攜帶的電荷越大。另外，為了消除由帶有過多正電荷的氮氣引起的背景噪音，在帶電分析物顆粒氣流流入采集器之前，會通過一種離子阱的裝置(帶有低負電壓)定向中和遷移率較大的顆粒上的電荷，而遷移率較小的帶電顆粒(分析物顆粒)則把他們的電荷轉移給采集器里的捕集網，而后由一個高靈敏度的靜電檢測計測量出總的電信號。其檢測結果與分析物顆粒有關，信號電流與樣品中分析物的質量成正比，因此無論何種化合物，只要進樣質量相同響應都基本一致，所以CAD檢測器能檢測所有非揮發物，包括不含發色團的物質，不論被測物分子結構如何，在同一個實驗中可同時檢測中性及陰陽離子。儀器參數在出廠是即設定，分析條件穩定，結果重復性好。靈敏度與檢出限與ELSD相比，CAD的靈敏度更高、檢出限更低，且檢測與化學結構無關，相同進樣質量的響應值相似，且全面兼容快速液相。