[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)酸性果膠酶的棘孢曲霉菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711343442.6
• 申請日: 2017-12-14
• 公開（公告）號: CN107988085B
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐曉東;周利偉;徐娟
• 申請（專利權(quán)）人: 青島蔚藍生物集團有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/26;C12R1/66
• 代理公司: 青島海昊知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

本發(fā)明屬于微生物改造技術(shù)領(lǐng)域，具體內(nèi)容涉及一株高產(chǎn)酸性果膠酶的棘孢曲霉突變菌株及其應(yīng)用。所述突變菌株的保藏編號為CCTCCNO:M2017783，可廣泛應(yīng)用于發(fā)酵生產(chǎn)酸性果膠酶。所述突變菌株固體搖瓶發(fā)酵3.5d后，其酸性果膠酶酶活達到938u/g，較出發(fā)菌提高47.7％，取得了意料不到的技術(shù)效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物改造技術(shù)領(lǐng)域，具體內(nèi)容涉及一株高產(chǎn)酸性果膠酶的棘孢曲霉突變菌株及其應(yīng)用。

技術(shù)背景

果膠是一種由不同酯化度的半乳糖醛酸以α-1，4糖苷鍵聚合而成的多糖鏈，常帶有鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、海藻糖等組成的側(cè)鏈，游離的羧基部分或全部可與鈣、鉀、鈉離子，特別是與硼化物結(jié)合在一起。果膠存在于所有的高等植物中，沉積于初生細胞壁和細胞層，在初生壁中與不同含量的纖維素、半纖維素、木質(zhì)素的微纖絲以及某些伸展蛋白相互交聯(lián)，使各種細胞組織結(jié)構(gòu)堅硬，從而表現(xiàn)出固有的形態(tài)。

果膠酶(pectinase)是指能夠分解果膠物質(zhì)的多種酶的總稱，大致可分為果膠水解酶(pectin hydrolases)、果膠裂解酶(pentinlyases)、果膠酯酶(pectin esterases)和原果膠酶等。按照作用最適pH的不同，果膠酶又可分為酸性果膠酶和堿性果膠酶。

目前研究和應(yīng)用較多的是酸性果膠酶，酸性果膠酶指內(nèi)聚半乳糖醛酸酶，可無規(guī)則的水解果膠酸分子中的α-1,4糖苷鍵，其作用最適pH在偏酸性范圍，主要應(yīng)用于食品行業(yè)的水果榨汁和果汁澄清，降低葡萄酒粘度，并可以與其它水解酶共同應(yīng)用于飼料行業(yè)。其主要來源于動植物及微生物，尤其是微生物，因為它的生長速度快、生長條件簡單、代謝過程特殊等特征，成為果膠酶的重要來源，其中真菌來源的果膠酶大部分在酸性pH值下具有高活性。大多數(shù)商業(yè)化生產(chǎn)的果膠酶也是來源于真菌，尤其是來源于黑曲霉和青霉。一些果膠酶基因已被克隆，測序并進行了表達。

目前采用天然菌株生產(chǎn)的果膠酶存在一些局限性，主要包括產(chǎn)酶性能較低、果膠酶的耐溫性能較差以及作用pH范圍較小等。因此，隨著果膠酶應(yīng)用越來越廣泛，迫切需要對果膠酶生產(chǎn)菌種進行相應(yīng)的改良，以提高果膠酶的產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為解決現(xiàn)有技術(shù)問題，提供了一株高產(chǎn)酸性果膠酶的棘孢曲霉(Aspergiulls aculeatus)菌株及其應(yīng)用。申請人以購自德國微生物菌種保藏中心(DSMZ)、保藏號為DSM 2334的棘孢曲霉為出發(fā)菌株，通過紫外誘變的方法，篩選獲得一株突變菌株，能大幅度提高酸性果膠酶的產(chǎn)量，有利于促進該酶的廣泛應(yīng)用。

本發(fā)明一方面提供了一種突變株棘孢曲霉T18(Aspergiulls aculeatus T18)，已于2017年12月11日保藏于中國武漢武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:M2017783。

本發(fā)明一方面提供了所述棘孢曲霉在生產(chǎn)酸性果膠酶中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了一種生產(chǎn)酸性果膠酶的方法，是以所述棘孢曲霉為發(fā)酵菌株。

本發(fā)明還提供了一種酸性果膠酶，是由所述棘孢曲霉發(fā)酵獲得的。

本發(fā)明以棘孢曲霉(Aspergiulls aculeatus)DSM2344為出發(fā)菌株，通過紫外誘變方法篩選獲得突變菌株棘孢曲霉T18。所述突變菌株固體搖瓶發(fā)酵3.5d后，其酸性果膠酶酶活達到938u/g，較出發(fā)菌提高47.7％，取得了意料不到的技術(shù)效果。本發(fā)明提供的棘孢曲霉突變菌株可廣泛應(yīng)用于酸性果膠酶的發(fā)酵生產(chǎn)，有利于降低該酶的生產(chǎn)成本，促進酸性果膠酶的推廣與應(yīng)用。

具體實施方式