[發(fā)明專利]肺動脈高壓治療藥物的干細胞篩選模型及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711341395.1
• 申請日: 2015-08-05
• 公開（公告）號: CN108070566A
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊雋;周芳;宮世強;韋清霞;趙雙;司書毅
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/12;C12N15/85;C12Q1/02
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所(普通合伙) 11130
• 代理人: 楊厚;王為

本發(fā)明屬于應(yīng)用干細胞技術(shù)建立肺動脈高壓新型治療藥物篩選的技術(shù)，以BMP信號下游關(guān)鍵基因Id1基因為靶點，設(shè)計雙報告基因原件插入Id1基因組構(gòu)建重組載體，并轉(zhuǎn)入人胚胎干細胞株，獲得穩(wěn)定表達的CGMCC11091的細胞株，將待測抗肺動脈高壓的化合物刺激CGMCC11091的細胞株，再用細胞裂解液裂解細胞，按基因檢測系統(tǒng)所述方法檢測熒光素酶表達活性，以Id1啟動子驅(qū)動的雙報告基因表達量作為指標(biāo)，獲得對Id1表達上調(diào)的治療肺動脈高壓化合物的篩選模型，本發(fā)明還包括模型在上調(diào)骨形態(tài)形成蛋白(BMP)信號的調(diào)節(jié)劑；上調(diào)骨形態(tài)形成蛋白II型受體表達水平的調(diào)節(jié)劑；改善肺動脈血流動力學(xué)的制劑；改善肺血管重構(gòu)的制劑；肺動脈高壓治療藥物以及心肺血管疾病治療藥物篩選中的應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于應(yīng)用干細胞技術(shù)建立肺動脈高壓新型治療藥物篩選方法的技術(shù)鄰域。

背景技術(shù)

肺動脈高壓(PAH)是由于肺小動脈原發(fā)病變而導(dǎo)致的肺動脈阻力增加，是一種少發(fā)但高致死率的病癥。肺血管阻力進行性升高，最終導(dǎo)致患者右心衰竭而死亡。其主要病理特征是嚴(yán)重肺血管重構(gòu)，包括內(nèi)皮功能紊亂和平滑肌細胞增殖所致的小肺動脈內(nèi)膜纖維化，中膜肥厚，外膜增生，叢樣病變及動脈管腔閉塞。在過去20年里包括前列環(huán)素和其類似物，內(nèi)皮素受體拮抗劑，磷酸二酯酶抑制劑在內(nèi)的幾類新藥已經(jīng)批準(zhǔn)上市，但3年死亡率仍然在40％左右。并且這些治療方案主要針對減輕血管緊張而達到治療效果。因此我們迫切需要研發(fā)改善血管重構(gòu)，延緩肺動脈高壓病程，提高患者生存率為目的的藥物。

優(yōu)化設(shè)計PAH理性治療方案應(yīng)基于對此疾病細胞分子機理的透徹認(rèn)識。研究表明肺動脈高壓中存在著BMP二型受體(BMPRII)表達缺陷和Id基因表達下調(diào)[Yang J at alCirculation Reserch 2008,102:1212-1221]。恢復(fù)生理水平BMP信號,尤其是血管細胞中Id基因的表達是改善血管重構(gòu)的肺動脈高壓藥物的新靶點之一[Yang J at al Am JPhysiol Lung Cell Mol Physiol 2013 15:305(4):L 312-21]。