[發(fā)明專利]一種應用于水體藍藻的預防和抑制方法

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• 申請日: 2017-12-14
• 公開（公告）號: CN107986456A
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發(fā)明（設計）人: 徐孟;金波
• 申請（專利權）人: 泰州永達生物科技有限公司
• 主分類號: C02F3/34
• 分類號: C02F3/34;C02F3/32
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所32237
• 代理人: 賀翔

1.一種應用于水體藍藻的預防和抑制方法，其特征在于：包括以下步驟，

步驟1、首先確定施加生物活性菌菌劑制品的水域，再利用噴灑機械將生物活性菌菌劑均勻施加在待處理水域，其中，生物活性菌菌劑是以枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）、施氏假單胞菌（Pseudomonas stutzeri）、水生假絲酵母（Candida aquatica）為菌種，采用有機、無機原料，將各菌種單獨發(fā)酵后復合配制而成；

步驟2、對待處理水域進行監(jiān)控，7-8小時后，再在待處理水域通過噴灑機械施加小球藻溶液，其中，小球藻溶液的小球藻含量為3～8×10⁷ cfu/ml、pH 值為6.5-9.5；

步驟3、對噴灑小球藻溶液的水域進行監(jiān)控，6-7小時后，依據監(jiān)控檢測的藍藻狀態(tài)，重復步驟1、步驟2的處理步驟。

2.根據權利要求1所述的一種應用于水體藍藻的預防和抑制方法，其特征在于：所述步驟1中的生物活性菌菌劑，有效活菌總數(shù)（含枯草芽孢桿菌、施氏假單胞菌、水生假絲酵母）≥2×10⁸ 個/mL，芽孢桿菌數(shù)≥1×10⁸ 個/mL，其中，有效活菌含枯草芽孢桿菌、施氏假單胞菌、水生假絲酵母。

3.根據權利要求1或2所述的一種應用于水體藍藻的預防和抑制方法，其特征在于：所述步驟1中生物活性菌菌劑的pH為4-6.5，霉菌雜菌的總數(shù)為≤3.0×10⁵ cfu/ml，大腸菌群為≤10 MPN/100mL；所述步驟1中生物活性菌菌劑噴灑時，需要對菌劑的有效活菌數(shù)進行測定，包括以下步驟，

a、以無菌操作將充分混勻的檢樣25mL放入含有225mL滅菌生物鹽水的滅菌錐形瓶內作成1：10的均勻稀釋液；

b、用1mL滅菌吸管吸取1：10稀釋液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL 滅菌生理鹽水的試管內，振搖混勻，做成 1：100的稀釋液；

c、另取1mL滅菌吸管，按上述操作順序，做10 倍遞增稀釋液，如此每遞增一次，即換用1支1mL滅菌吸管；

d、選擇 1：10^-7、1：10^-8兩個適宜稀釋度，各取 1mL 分別加入計數(shù)培養(yǎng)基平皿，每個稀釋度做三個平皿；

e、稀釋液移入平皿中，應及時將冷至45℃的計數(shù)培養(yǎng)基注入平皿約15mL-20mL，并轉動平皿使混合均勻，同時將計數(shù)培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液檢樣用的滅菌生理鹽水的滅菌平皿內作空白對照，枯草芽孢桿菌、施氏假單胞菌使用葡萄糖培養(yǎng)基培養(yǎng)，水生假絲酵母使用淀粉培養(yǎng)基培養(yǎng)；

f、待瓊脂完全凝固后，翻轉平板，置 32℃±1℃溫箱內培養(yǎng)48h±2h，選取菌落數(shù)在 30-300之間的平板進行計數(shù)；

g、菌數(shù)計算，根據每一稀釋度采用三個平板菌落的平均數(shù)，然后乘以樣品的稀釋倍數(shù)，得每毫升樣品中活菌數(shù)；如有兩個稀釋度，其生長的菌落均在30-300之間，視兩者之比如何來決定，如其比值小于2，應報告其平均數(shù)；如大于2，則報告其中較小的數(shù)字。

4.根據權利要求1所述的一種應用于水體藍藻的預防和抑制方法，其特征在于：所述步驟1中生物活性菌菌劑噴灑時，需要對菌劑的有效活菌數(shù)進行測定，包括以下步驟，

a、先將用于培養(yǎng)菌種的液體培養(yǎng)基倒入10 mm比色杯中，選用600nm波長分光光度計上調節(jié)零點，作為空白對照；

b、再將檢樣300 mL放入滅菌廣口瓶，上下劇烈振搖30次-40次，用滅菌吸管吸出注入10mm比色杯中，測定600nm波長下的光密度值。

5.根據權利要求3所述的一種應用于水體藍藻的預防和抑制方法，其特征在于：所述步驟1中淀粉培養(yǎng)基的成分為淀粉20g、硝酸鉀1.0g、磷酸氫二鉀0.5g、氯化鈉0.5g、硫酸鎂0.5g、硫酸鐵0.01g，混合后加蒸餾水至1000mL，pH7.2±0.1，首先將以上所有成分加入蒸餾水中，按2%添加瓊脂，再加熱溶解，校正pH 7.2±0.1，最后分裝、高壓滅菌121℃，時間為15min-20min，使用時加熱熔化瓊脂，冷卻至45℃時使用。