[發(fā)明專(zhuān)利]吲哚或吲哚與鈣鎂離子在促進(jìn)海洋蛭弧菌蛭質(zhì)體形成中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711333687.0
• 申請(qǐng)日: 2017-12-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107937330B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡俊鵬;陳丹
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 華南理工大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/38
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/38;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 崔紅麗

本發(fā)明公開(kāi)一種吲哚或吲哚與鈣鎂離子在促進(jìn)海洋蛭弧成中的應(yīng)用，屬于蛭弧菌技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明利用吲哚或吲哚與鈣鎂離子，促進(jìn)了蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDN?1蛭質(zhì)體的形成；確認(rèn)了其具有明顯延長(zhǎng)蛭弧菌微生物制劑保質(zhì)期的效果；且可在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)有效保持蛭弧菌微生物制劑中菌體的活力。本發(fā)明提供的高密度蛭質(zhì)體可抑制會(huì)引發(fā)水產(chǎn)養(yǎng)殖生物病害的弧菌，具有廣裂解譜性質(zhì)，且其裂解作用同蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDN?1混合體(既含有蛭質(zhì)體又含有游泳體)相比較優(yōu)。本發(fā)明提供的促蛭質(zhì)體培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可行，適用于推廣使用，有望為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)防治病害作出貢獻(xiàn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于蛭弧菌技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種吲哚或吲哚與鈣鎂離子在促進(jìn)海洋蛭弧菌蛭質(zhì)體形成中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

弧菌(vibrios)是海洋環(huán)境中最為常見(jiàn)的細(xì)菌類(lèi)群之一，廣泛存在于海水、海底沉積物及魚(yú)、蝦、貝、蟹、海參、海帶等等海產(chǎn)品中。《伯杰氏細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》第8版記載了35種弧菌，它們中相當(dāng)一部分是水產(chǎn)養(yǎng)殖生物的重要致病菌。在水產(chǎn)業(yè)界，由副溶血弧菌、溶藻弧菌、鰻弧菌等各種弧菌引發(fā)的養(yǎng)殖生物的疾病統(tǒng)稱(chēng)為弧菌病(vibriosis)，它每年給水產(chǎn)業(yè)界造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

目前，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，針對(duì)病害，仍普遍使用抗生素和化學(xué)藥物，導(dǎo)致耐藥菌株產(chǎn)生及藥殘超標(biāo)，引發(fā)多寶魚(yú)藥殘事件等食品安全問(wèn)題。而蛭弧菌(Bdellovibrio-and-likeorganisms，BALOs)為一類(lèi)極其好氧的寄生性革蘭氏陰性菌，具寄生、進(jìn)而裂解其它細(xì)菌的作用。眾多研究表明，蛭弧菌具有裂解水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖中常見(jiàn)致病菌如溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、霍亂弧菌(Vibrio cholera)等的能力，通過(guò)抑制這些有害菌群的滋生和轉(zhuǎn)移，能夠保持甚至增加水產(chǎn)動(dòng)物腸道中本就對(duì)致病弧菌有抑制作用的益生菌如乳酸菌和雙歧桿菌等的數(shù)量，激發(fā)水產(chǎn)動(dòng)物腸道免疫系統(tǒng)運(yùn)作，增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗病力和抗應(yīng)激能力，從而改善水產(chǎn)動(dòng)物腸道菌群結(jié)構(gòu)、提高其存活率。

蛭弧菌廣泛存在于自然環(huán)境如海洋等，也存在于魚(yú)、蝦、牛、馬、豬、鴨和人等腸道，為它們各自微生物群落固有一員，但不具侵染植物、魚(yú)、蝦及人等哺乳動(dòng)物細(xì)胞能力。此外，它在健康人腸道中數(shù)量眾多，維持著腸道微生態(tài)系平衡；在患腸炎等病人中則嚴(yán)重減少乃至消失。它在調(diào)控人腸道各微生物類(lèi)群、維持生態(tài)平衡的有益作用。因此，蛭弧菌因可裂解致病性弧菌而在海水養(yǎng)殖中倍受重視，目前已成為養(yǎng)殖中有益菌之一。雖然正在被越來(lái)越廣泛的使用，但目前市面上的產(chǎn)品幾乎不存在有活性的蛭弧菌，或數(shù)量極少。

我們通過(guò)研究蛭弧菌發(fā)現(xiàn)，其生活史包括帶鞭毛營(yíng)運(yùn)動(dòng)但不增殖的游泳體階段(free swimming phase)和在宿主細(xì)胞內(nèi)行生長(zhǎng)繁殖的蛭質(zhì)體階段(Bdelloplast phase)，且蛭弧菌完成一個(gè)生命周期僅需4個(gè)小時(shí)。在游泳體階段，蛭弧菌需消耗巨大能量和氧營(yíng)運(yùn)動(dòng)生活，以便遇獲宿主。如在一段時(shí)間內(nèi)未遇宿主，則能量和/或氧耗盡而死去。此階段一般不超過(guò)數(shù)小時(shí)。換句話(huà)說(shuō)，游泳體蛭弧菌極易死亡，極難存活。在蛭質(zhì)體階段，蛭弧菌已進(jìn)入到宿主胞質(zhì)空間，在宿主細(xì)胞壁保護(hù)下，脫去了鞭毛，通過(guò)分解宿主細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)自身，成長(zhǎng)桿狀。之后，通過(guò)多分裂，分成多個(gè)小段，每小段長(zhǎng)出鞭毛，即成子一代游泳體。

已有研究表明，蛭質(zhì)體階段，生長(zhǎng)(變長(zhǎng)的過(guò)程)可被隨時(shí)打斷。待環(huán)境條件合適后，蛭質(zhì)體再行分裂、分化成多個(gè)游泳體。因此，相比脆弱且高耗氧的游泳體，低耗氧的蛭質(zhì)體耐受惡劣環(huán)境能力強(qiáng)。且蛭質(zhì)體和游泳體具同等作用力。因此解決當(dāng)前蛭弧菌產(chǎn)品所存在的活菌存活率低、保質(zhì)期短的問(wèn)題的關(guān)鍵在于在高濃度發(fā)酵過(guò)程中轉(zhuǎn)變游泳體為蛭質(zhì)體，同時(shí)延緩蛭質(zhì)體發(fā)育。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明的目的在于提供一種吲哚或吲哚與鈣鎂離子在促進(jìn)海洋蛭弧菌蛭質(zhì)體形成中的應(yīng)用。

通過(guò)添加吲哚或吲哚與鈣鎂離子來(lái)促進(jìn)海洋蛭弧菌蛭質(zhì)體形成，提高其濃度的方法。該方法彌補(bǔ)了實(shí)驗(yàn)技術(shù)中蛭弧菌微生物制劑保質(zhì)期較短的缺點(diǎn)。