[發明專利]一種長鏈非編碼RNA及其組合物在診斷/治療膽管癌中的應用

在審

• 申請號: 201711331671.6
• 申請日: 2017-12-13
• 公開（公告）號: CN108220434A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 繆林;于洋;季國忠;李全朋;葛賢秀;王飛;張秀華
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學第二附屬醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113;C12N15/11;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 郎堅

本發明屬于基因工程領域，特別涉及一種長鏈非編碼RNA，PVT1及其組合物，在制備診斷膽管癌及靶點藥物治療中的應用。同時，本發明還涉及其引物，在制備診斷直結腸癌試劑中的應用。通過研究該長鏈非編碼RNA細胞水平的表達，揭示了其與膽管癌發病機理的關系。

技術領域

本發明屬于基因工程領域，特別涉及一種長鏈非編碼RNA，PVT及其組合物，在制備診斷膽管癌及靶點藥物治療中的應用。同時，本發明還涉及其引物，在制備診斷膽管癌試劑中的應用。通過研究該長鏈非編碼RNA細胞水平的表達，揭示了其與膽管癌發病機理的關系。

背景技術

腫瘤是嚴重威脅人類健康的一大主要元兇，對腫瘤惡性進展的分子機制研究一直是學界關注的焦點與難點。已有研究報道，腫瘤細胞在生長過程中具有促進增殖和侵襲轉移，持續血管生成，免疫耐受及免疫逃逸等細胞表型特征。研究表明，腫瘤細胞的生長是一個復雜的多基因調控和多步驟、多階段發展的過程，包括p53、p21等抑癌基因的失活和Blc1、Myc 等原癌基因的激活。迄今為止，惡性腫瘤的發生機制仍未完全清楚，需要進一步探索。

研究顯示：除這些已被廣泛研究的編碼基因外，長非編碼RNA(long noncodingRNAs， lncRNAs)的異常表達也參與腫瘤惡性進展。lncRNAs是一類轉錄本長度超過200nt的RNA 分子，有別于其他小分子非編碼RNA，其可以順式(in cis)或反式(in trans)作用的方式調節RNA代謝、蛋白質功能活性、組蛋白修飾及染色質重塑，在表觀遺傳學、轉錄以及轉錄后水平廣泛參與細胞生物學過程。越來越多的研究證實，lncRNAs不僅在維持機體的正常生理功能及發育過程中發揮重要的調控作用，其異常表達與疾病的發生發展尤其是腫瘤的惡性進展有著密切的聯系。

膽管癌(cholangiocarcinoma，CCA)是起源于膽管上皮細胞的高度侵襲性的惡性腫瘤，其全球發生率，尤其是在亞洲國家中呈逐年上升趨勢，5年生存率不足5％。膽管癌早期發病隱匿，常無明顯的臨床表現，明確診斷時已至中晚期。盡管目前已有手術、放療、化療等臨床治療手段，但是膽管癌患者的預后仍很差。已有研究表明，lncRNAs的異常表達介導膽管癌惡性進展。上調的H19和HULC可通過ceRNA機制促進膽管癌細胞的遷移和侵襲。lncRNA CPS1intronic transcript 1(CPS1‐IT1)可促進膽管癌細胞的增殖及抑制凋亡，且影響病人的肝功能及預后。進一步文獻檢索結果顯示：lncRNAs可以通過發揮原癌基因的作用，參與膽管癌細胞增殖、凋亡和侵襲轉移等生物學過程，提示更多膽管癌惡性進展相關lncRNAs的功能和機制具有進一步研究的必要性。

發明內容

本發明的目的是提供一種長鏈非編碼RNA在診斷膽管癌以及在制備治療膽管癌藥物中的應用。本發明采用以下技術方案：

本發明提供一種長鏈非編碼RNA，PVT1，其特征在于，長度為1957bp，其序列如SEQID NO:1所示，即:

檢測上述長鏈非編碼RNA的試劑在制備診斷膽管癌試劑中的應用

進一步的，本發明還提供一種藥物組合物，包括診斷上述長鏈非編碼RNA的檢測試劑。

進一步的，所述的藥物組合物在制備治療膽管癌藥物中的應用。

另一方面，本發明還提供兩組檢測PVT1的引物組，其序列分別如SEQ ID NO：2、3和4、5所示，即：SEQ ID NO:2PVT1FTGAGAACTGTCCTTACGTGACC，SEQ ID NO：3PVT1RAGAGCACCAAGACTGGCTCT，SEQ ID NO:4FAGCCACATCGCTCAGACAC，SEQ ID NO:5RGCCCAATACGACCAAATCC。

進一步的，本發明請求保護上述任意一種引物在制備診斷膽管癌試劑中的應用。