[發(fā)明專利]一種跨越血眼屏障磁性納米顆粒的制備方法及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201711325632.5 | 申請(qǐng)日： | 2017-12-13 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN108125926B | 公開（公告）日： | 2021-03-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 齊蕾;呂秀娟;楊梅;潘統(tǒng)鶴;程如梅;姚清清;張立樹;陳路呀;趙長榮;戴黎明 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 溫州醫(yī)科大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | A61K9/51 | 分類號(hào)： | A61K9/51;A61K47/46;A61K47/42;A61K31/704;A61P27/02;A61P35/00 |
| 代理公司： | 溫州名創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33258 | 代理人： | 陳加利 |
| 地址： | 325000 浙江省溫州市甌海*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 跨越 屏障 磁性 納米 顆粒 制備 方法 及其 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明公開了一種跨越血眼屏障磁性納米顆粒的制備方法及其應(yīng)用，包括以下步驟：取純化的細(xì)菌磁小體BMs，利用N?琥珀酰亞胺3?(2?吡啶二硫代)丙酸酯為交聯(lián)劑，將細(xì)菌磁小體BMs的氨基端與TAT多肽中半胱氨酸的巰基結(jié)合，獲得可跨血眼屏障的磁性納米顆粒，該磁性納米顆粒為TAT?BMs復(fù)合載體。該磁性納米顆粒能夠跨越血眼屏障，擴(kuò)展了磁性納米材料在眼部疾病治療中應(yīng)用潛力。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種磁性納米顆粒，具體是指一種跨越血眼屏障磁性納米顆粒的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)
細(xì)菌磁小體（BMs）是生物合成的磁性納米顆粒，具有獨(dú)特的納米結(jié)構(gòu)、表面覆蓋了與細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)相近的生物膜、大小形態(tài)穩(wěn)定。BMs在生物醫(yī)藥領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用潛力，例如核磁共振成像、載藥以及磁熱療等。與化學(xué)合成的磁性納米顆粒不同，BMs是由趨磁細(xì)菌在細(xì)胞內(nèi)合成的，主要成分為Fe3O4或Fe3S4，大小為30—120 nm。
眼睛是人體非常脆弱的器官，整個(gè)器官在血眼屏障的保護(hù)下形成一個(gè)幾乎密閉的空間。然而血眼屏障也阻礙了大部分的藥物進(jìn)入眼部。目前，尚未有BMs跨越血眼屏障的相關(guān)報(bào)道和應(yīng)用，從而限制了基于BMs構(gòu)建的納米材料在眼部疾病治療中的應(yīng)用，因此有必要對(duì)此進(jìn)行研究和改進(jìn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種跨越血眼屏障磁性納米顆粒的制備方法。
本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種跨越血眼屏障磁性納米顆粒。
本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種跨越血眼屏障磁性納米顆粒在一種眼部用藥載體的應(yīng)用。
為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的第一個(gè)目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是包括以下步驟：
取純化的細(xì)菌磁小體BMs，利用N-琥珀酰亞胺3-(2-吡啶二硫代)丙酸酯為交聯(lián)劑，將細(xì)菌磁小體BMs的氨基端與TAT多肽中半胱氨酸的巰基結(jié)合，獲得可跨血眼屏障的磁性納米顆粒，該磁性納米顆粒為TAT-BMs復(fù)合載體。
進(jìn)一步設(shè)置是細(xì)菌磁小體BMs與N-琥珀酰亞胺3-(2-吡啶二硫代)丙酸酯在室溫條件下混勻?qū)?xì)菌磁小體BMs進(jìn)行活化，活化處理的細(xì)菌磁小體BMs與N-琥珀酰亞胺3-(2-吡啶二硫代)丙酸酯混合體系與TAT多肽在0-4 ℃下混勻過夜，混合物通過反復(fù)磁性吸附清洗，獲得純化的TAT-BMs復(fù)合載體。
進(jìn)一步設(shè)置是純化的細(xì)菌磁小體BMs通過以下方式獲得：
從格瑞菲斯瓦爾德磁螺菌MSR-1中分離純化細(xì)菌磁小體BMs，具體方法如下：收集對(duì)數(shù)生長期的MSR-1菌株，將菌株重懸于PBS緩沖液中，通過超聲破碎和磁性回收的方法收集粗提的細(xì)菌磁小體BMs，將粗提的細(xì)菌磁小體BMs通過超聲清洗和磁性回收的方法繼續(xù)提純，直到上清無法檢測到蛋白質(zhì)和DNA殘留后，獲得了純化的細(xì)菌磁小體BMs。
進(jìn)一步設(shè)置是TAT多肽和純化的細(xì)菌磁小體BMs的質(zhì)量比：1:2-1:10。
進(jìn)一步設(shè)置是TAT多肽和純化的細(xì)菌磁小體BMs的最佳質(zhì)量比為1:5。
本發(fā)明的第二個(gè)發(fā)明是提供了一種如所述的制備方法所制備的可跨血眼屏障的磁性納米顆粒，該磁性納米顆粒為TAT-BMs復(fù)合載體。
本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供了一種如所述的跨越血眼屏障磁性納米顆粒在制備跨越血眼屏障的眼部藥物的應(yīng)用，該跨越血眼屏障磁性納米顆粒作為跨越血眼屏障的眼部藥物的載體，從而幫助眼部藥物跨越血眼屏障。
本發(fā)明的有益效果是，提供一種具有跨越血眼屏障功能的磁性納米顆粒，并提供了相應(yīng)的制備方法，擴(kuò)展了磁性納米材料在眼部疾病治療中應(yīng)用潛力，同時(shí)還提供該磁性納米顆粒作為眼部藥物在眼部治療時(shí)跨越血眼屏障的載體的應(yīng)用。具體效果見試驗(yàn)例。
附圖說明
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