[發(fā)明專利]生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711323707.6
• 申請(qǐng)日: 2017-12-13
• 公開（公告）號(hào): CN109913512A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊晨;徐敏;秦兵兵;李乃強(qiáng);劉修才
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海凱賽生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司;凱賽生物產(chǎn)業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C12P7/64
• 分類號(hào): C12P7/64;C12R1/74;C12R1/72
• 代理公司: 北京律智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11438
• 代理人: 王瑩;于寶慶

1.生物發(fā)酵生產(chǎn)長(zhǎng)鏈二元酸的方法，其特征在于：所述發(fā)酵開始時(shí)，或者，所述發(fā)酵過程中，菌體濃度達(dá)到OD₆₂₀為50～200，優(yōu)選90～160。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述菌體經(jīng)濃縮后，再加入發(fā)酵體系中。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：將所述菌體培養(yǎng)，當(dāng)菌體濃度達(dá)到OD₆₂₀為15～30時(shí)，將菌體濃縮，再加入發(fā)酵體系中。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述菌體的濃縮倍數(shù)為2～40倍，優(yōu)選5～30倍，進(jìn)一步優(yōu)選5～20倍。

5.如權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：所述濃縮的方法為離心分離或膜分離；

其中，所述離心分離的離心力為2000G以上；所述膜分離使用微濾膜或超濾膜進(jìn)行分離；當(dāng)采用微濾膜分離時(shí)，所述微濾膜為孔徑0.1～1μm的有機(jī)或無(wú)機(jī)膜，分離時(shí)的壓力為0.01～0.2Mpa；當(dāng)采用超濾膜分離時(shí)，所述超濾膜為膜截留分子量1～1,000KDa的有機(jī)或無(wú)機(jī)膜，分離時(shí)的壓力為0.1～1.0Mpa。

6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基的添加量為發(fā)酵罐體積的80％以下，優(yōu)選5～50％，更優(yōu)選15～40％，最優(yōu)選15～30％。

7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：加入菌體前，加入所述發(fā)酵培養(yǎng)基；或者，加入所述菌體時(shí)，加入所述發(fā)酵培養(yǎng)基；或者，所述發(fā)酵過程中，加入所述發(fā)酵培養(yǎng)基；

和/或，所述發(fā)酵培養(yǎng)基以連續(xù)或者間歇的方式補(bǔ)加。

8.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：所述菌種為熱帶假絲酵母(CandidaTropicalis)或清酒假絲酵母(Candida sake)。

9.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵的底物包括C9～C18的正烷烴、直鏈飽和脂肪酸、直鏈飽和脂肪酸酯和直鏈飽和脂肪酸鹽中的一種或多種；優(yōu)選包括C11～C16的正烷烴、直鏈飽和脂肪酸、直鏈飽和脂肪酸酯和直鏈飽和脂肪酸鹽中的一種或多種；更優(yōu)選為C11、C12、C13、C15、C14或C16的正烷烴、直鏈飽和脂肪酸、直鏈飽和脂肪酸酯和直鏈飽和脂肪酸鹽中的一種；

所述發(fā)酵過程中，所述烷烴以連續(xù)或間歇的方式加入；

和/或，所述長(zhǎng)鏈二元酸包括壬二酸、癸二酸、十一碳二元酸、十二碳二元酸、十三碳二元酸、十四碳二元酸、十五碳二元酸、十六碳二元酸、十七碳二元酸、十八碳二元酸、或9-烯-十八碳二酸中的一種或多種。

10.如權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵時(shí)的罐溫為27～35℃；

和/或，所述發(fā)酵時(shí)的通風(fēng)比為1∶1.0～0.2vvm；

和/或，所述發(fā)酵時(shí)的罐壓為0.05～0.1Mpa；

和/或，所述發(fā)酵時(shí)的pH為7.0～8.5；

和/或，所述發(fā)酵時(shí)間為100～170h。