[發明專利]一種利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝膠性的方法

有效

• 申請號: 201711318113.6
• 申請日: 2017-12-12
• 公開（公告）號: CN108157582B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 蘆鑫;張勛;高錦鴻;張麗霞;孫強;宋國輝;黃紀念
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院
• 主分類號: A23J3/14
• 分類號: A23J3/14;A23J3/34
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新;楊海霞

1.一種利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝膠性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）芝麻粉碎除油：將芝麻粉碎，采用有機溶劑萃取芝麻中的油脂，萃取結束后，收集除油后的芝麻粉，備用；

2）復酶水解：將除油后的芝麻粉與水混合配成5－25%的溶液a并調節pH至3.0－5.5，加入復酶于30－60℃水解反應30－120 min，水解完畢后，冷卻、靜置、離心，收集沉淀a，備用；

3）固定化酶制備：將殼聚糖與環氧氯丙烷按1g：3－5ml的比例混合后于60－70℃反應10－30 min，然后加入殼聚糖質量1－5倍的多胺，并于70－80℃反應5－25 min，反應結束后，收集固體a備用；

在氮氣保護下，在0.05－0.2 mol/L的Fe₃O₄溶液中加入等體積的濃氨水，在70－80℃下反應0.5－2 h，反應結束后，收集固體Fe₃O₄微球，儲存于pH2－4的蒸餾水中；

將固體a用稀鹽酸溶解后，分別加入占殼聚糖質量40－60%、5－20%的固體Fe₃O₄微球和三聚磷酸鈉，攪拌均勻，用磁鐵吸附固體顆粒，獲得磁性殼聚糖微粒；

將磁性殼聚糖微粒加入到含2－6%戊二醛的磷酸緩沖液中配成濃度0.2－0.5%的懸濁液，室溫攪拌反應1－4h，然后加入含2－8%谷氨酰胺轉移酶的磷酸緩沖液，繼續攪拌反應4－6 h，用磁鐵吸附微粒，蒸餾水洗凈，獲得固定化谷氨酰胺轉移酶，備用；其中，含2－8%谷氨酰胺轉移酶的磷酸緩沖液加入量為懸濁液體積的1－3倍；

4）固定化酶改性：將步驟2）獲得的沉淀a與水混合配成5－20%的溶液b并調節pH至7.5－9.0，然后加入固定化谷氨酰胺轉移酶于30－65℃改性20－100min，離心，收集濾液備用；

5）改性蛋白回收：將步驟4）所得濾液中和后，超濾膜處理，濃縮至50%時，加入蒸餾水恢復至初始體積，再次使用超濾膜進行超濾處理，重復上述操作2－5次，用蒸餾水調節固形物濃度至5－15%，然后噴霧干燥，即獲得成品；

步驟3）中，所述殼聚糖、環氧氯丙烷、多胺的反應在微波反應器中進行；所述的多胺為精胺和/或亞精胺；

步驟4）中，固定化谷氨酰胺轉移酶的添加量是溶液b的5－15%；

步驟5）中，采用的超濾膜截留分子量為8000－50000 Da。

2.如權利要求1所述利用固定化酶改性提高芝麻蛋白凝膠性的方法，其特征在于，步驟2）中，所述復酶是由纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶組成的混合酶，復酶的添加量為除油后芝麻粉質量的0.05－0.50%，其中，復酶中各原料的重量百分比為：纖維素酶30－60%、半纖維素酶15－35%，果膠酶為20－45%。