[發明專利]一種基于堿性磷酸酯酶催化反應觸發CdS光電流的免疫分析方法

有效

• 申請號: 201711316296.8
• 申請日: 2017-12-12
• 公開（公告）號: CN108152485B
• 公開（公告）日: 2019-11-15
• 發明（設計）人: 王光麗;袁芳;楊高霞;董玉明
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N27/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于堿性磷酸酯酶催化反應觸發CdS光電流的免疫分析方法，其特征在于：

a、采用化學沉積法制備CdS修飾的光電極，具體步驟為：將2％質量濃度的Triton-X100溶液與0.5-1.2mol/L的CdSO₄溶液混合后加入氨水溶液調節溶液的pH為10-13；然后往上述反應溶液中加入0.5M的硫脲溶液；之后將清洗過的ITO電極浸入到上述溶液中90℃下反應5-15分鐘，取出沖洗電極，過夜晾干后即制得CdS修飾的光電極；

b、將制得的CdS修飾電極浸沒在含有10mM的金屬離子溶液、20mM的六次亞甲基四胺、0.2M的氧化劑形成的混合溶液中，90℃下反應10分鐘后取出，小心洗滌；

c、以小鼠IgG為模型物，進行了光電化學免疫測定：吸取0.5mg/mL小鼠IgG捕獲抗體滴加到96微孔板里，4℃孵育過夜后用Tris-HCl緩沖溶液將96微孔板進行洗滌；然后，加入牛血清蛋白封閉液4℃孵育2h，用Tris-HCl緩沖溶液洗滌；隨后，將不同濃度的小鼠IgG加入到固定了捕獲抗體的微孔板中，37℃孵育1小時后洗滌；將負載了小鼠IgG檢測抗體和堿性磷酸酯酶的Au納米顆粒加入到微孔板中，37℃孵育1小時后洗滌；最后，將抗壞血酸磷酸酯加入到上述完成免疫反應的微孔板中，37℃反應30分鐘；

d、將b步驟得到的電極浸泡在c步驟產生的溶液中一段時間，之后將電極小心洗滌干凈；最后，將電極放入含有0.05mol/L KCl和0.1mol/L三乙醇胺的pH為7.0的Tris緩沖溶液中，以銀/氯化銀電極作為參比電極，鉑絲作為對電極，+0.1V電位下在自制的光電化學測定儀器上進行光電流測定。

2.根據權利要求1所述的一種基于堿性磷酸酯酶催化反應觸發CdS光電流的免疫分析方法，其特征在于步驟b中所述的金屬離子為Fe²⁺或Co²⁺或Mn²⁺。

3.根據權利要求1所述的一種基于堿性磷酸酯酶催化反應觸發CdS光電流的免疫分析方法，其特征在于步驟b中所述的氧化劑為H₂O₂或者NaClO。