[發(fā)明專利]采用高效液相法測定中間產(chǎn)物6,6-二溴青霉烷酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711314978.5
• 申請日: 2017-12-12
• 公開（公告）號: CN108107120B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 常明珠;張立明;張艷紅
• 申請（專利權(quán)）人: 山東鑫泉醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 青島發(fā)思特專利商標(biāo)代理有限公司 37212
• 代理人: 耿霞

本發(fā)明屬于化工檢測領(lǐng)域，具體的涉及一種采用高效液相法測定中間產(chǎn)物6,6?二溴青霉烷酸的方法。本發(fā)明通過確定高效液相色譜檢測條件，其中流動相為甲醇?磷酸氫二鈉緩沖溶液、乙腈?磷酸氫二鈉緩沖溶液、甲醇?醋酸銨緩沖溶液或乙腈?醋酸銨緩沖溶液中的一種；色譜柱為C18色譜柱；分別配制6,6?二溴青霉烷酸的標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液；制作標(biāo)準(zhǔn)曲線；計算供試品的含量。結(jié)果表明6,6?二溴青霉烷酸的含量在0.1～1.2mg/ml的濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，且相關(guān)系數(shù)是0.9997，采用空白基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)校正，顯示6,6?二溴青霉烷酸平均回收率在90％以上，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.0％。該檢測方法操作簡單便捷、色譜峰形好、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠和重現(xiàn)性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化工檢測領(lǐng)域，具體的涉及一種采用高效液相法測定中間產(chǎn)物6,6-二溴青霉烷酸的方法。

背景技術(shù)

舒巴坦鈉是由人工合成的不可逆性競爭型β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，最先由美國Pfizer研究室開發(fā)，通常與青霉素類或頭孢菌素類藥物合用，使其避免被β-內(nèi)酰胺酶破壞，加強(qiáng)了抗菌活性，適用于呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、皮膚軟組織等感染。β-內(nèi)酰胺酶抑制劑在克服嚴(yán)重耐藥菌感染方面把整個β-內(nèi)酰胺類抗生素帶入了一個新時代。

根據(jù)文獻(xiàn)資料報道，合成舒巴坦鈉是采用6-氨基青霉烷酸為原料，經(jīng)重氮化、溴化、氧化、還原、成鹽，制備舒巴坦鈉。此法已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了工業(yè)化大生產(chǎn)，但關(guān)于舒巴坦鈉合成過程中產(chǎn)生的中間產(chǎn)物的檢測方法在國內(nèi)外還沒有現(xiàn)行的檢測標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，國外由于其文化發(fā)展程度的差異，主要將目標(biāo)放在成品臨床醫(yī)療中的使用情況，而中間產(chǎn)物的相關(guān)檢測方法的報道很少。

由于目前尚無良好有效的檢測手段，因此建立一種檢測以6-APA為起始原料合成舒巴坦鈉時產(chǎn)生的中間產(chǎn)物6,6-二溴青霉烷酸的含量的方法非常重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種采用高效液相法測定中間產(chǎn)物6,6-二溴青霉烷酸的方法。該方法具有操作簡單便捷，色譜峰形好，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)，不僅能夠準(zhǔn)確的測定6,6-二溴青霉烷酸的含量，而且能夠控制產(chǎn)品中其余雜質(zhì)的含量，對后續(xù)中間體產(chǎn)品及舒巴坦鈉的生產(chǎn)起指導(dǎo)作用。

本發(fā)明所述的采用高效液相法測定中間產(chǎn)物6,6-二溴青霉烷酸的方法，具體包括以下步驟：

(1)確定高效液相色譜檢測條件，其中流動相為甲醇-磷酸氫二鈉緩沖溶液、乙腈-磷酸氫二鈉緩沖溶液、甲醇-醋酸銨緩沖溶液或乙腈-醋酸銨緩沖溶液中的一種；色譜柱為C18色譜柱；

(2)分別配制6,6-二溴青霉烷酸的標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液；

(3)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(4)計算供試品的含量。

其中：

高效液相色譜檢測條件為：色譜柱是250*4.6mm，5μm的C18色譜柱；流動相為乙腈-醋酸銨緩沖溶液；流速為0.8-1.3ml/min；檢測器波長為225-235nm；柱溫為25～35℃及其進(jìn)樣體積為20μL。

流動相乙腈-醋酸銨緩沖溶液中乙腈與醋酸銨的體積比為25～35:65～75。

流動相乙腈-醋酸銨緩沖溶液中乙腈與醋酸銨的體積比為30:70。

高效液相色譜的檢測條件中洗脫方式是等度洗脫，洗脫時間為15min。

流動相中醋酸銨緩沖溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.07％～0.09％。

流動相中醋酸銨緩沖溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08％。

色譜柱柱溫為30℃；檢測器波長為230nm；流速為1.0ml/min。