[發(fā)明專利]細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711303962.4
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN109900895A
• 公開（公告）日: 2019-06-18
• 發(fā)明（設計）人: 趙志恒;賈江濤
• 申請（專利權）人: 北京和杰創(chuàng)新生物醫(yī)學科技有限公司
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/552
• 代理公司: 天津三元專利商標代理有限責任公司 12203
• 代理人: 胡婉明

本發(fā)明提供一種細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法，其包括：第一步清洗待處理的玻璃薄片；第二步在清洗好的玻璃薄片上涂覆一層N?β?氨乙基?γ?氨丙基三甲氧基硅烷溶液，進行氨基化處理；第三步在進行氨基化處理后的玻璃薄片上再涂覆一層戊二醛溶液，進行醛基化處理，得到醛基化玻璃薄片；第四步將醛基化玻璃薄片用純化水清洗干凈，放置在潔凈環(huán)境下自然干燥后即可使用；有效提高細胞與玻璃薄片的黏附質量并能降低本底背景，有效提高細胞檢測結果的有效性和準確性。

技術領域

本發(fā)明涉及生物體外診斷試劑檢測用抗原載體處理方法，尤其涉及一種細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法。

背景技術

目前，免疫學檢測技術及其產品已廣泛應用于重大傳染性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤標志物、食品安全及優(yōu)生優(yōu)育等眾多檢測領域，在間接免疫熒光法檢測試驗中，對包被好抗原基質的檢測是必不可少的，其承載抗原基質的玻璃薄片是非常重要的。目前檢測用基質是在塑料載片或玻璃載片的固定位置包被某種抗原，每張載片上形成1至10份包被某種抗原的固定位置，這樣，在檢測環(huán)節(jié)可以同時開展1至10個病人的同步檢測，由于玻璃薄片表面的粘附性對抗原基質的影響大，并會給間接免疫熒光法的檢測帶來諸多的不確定性，因此需要對細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法進行改進。

發(fā)明內容

本發(fā)明的主要目的在于克服現有技術存在的上述缺陷而提供一種細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法，有效提高細胞與玻璃薄片的黏附質量并能降低本底背景，有效提高細胞檢測結果的有效性和準確性。

本發(fā)明的目的是由以下技術方案實現的。

本發(fā)明細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法，其特征在于，包括以下步驟：第一步：清洗待處理的玻璃薄片；第二步：在清洗好的玻璃薄片上涂覆一層N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液，進行氨基化處理；第三步：在進行氨基化處理后的玻璃薄片上再涂覆一層戊二醛溶液，進行醛基化處理，得到醛基化玻璃薄片；第四步：將醛基化玻璃薄片用純化水清洗干凈，放置在潔凈環(huán)境下自然干燥后即可使用。

前述的細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法，其中，所述第一步的清洗待處理的玻璃薄片是把玻璃薄片一張一張的泡進含有洗滌靈的水中，洗去片子表面的油漬,浸泡一小時之后用流動的純化水清洗干凈；接著把純化水清洗干凈的玻璃薄片一張一張的放進鉻硫酸溶液中，浸泡72±2小時；然后在鼓風干燥箱中烘干，鼓風干燥箱的溫度控制在70±5℃；所述第二步的對清洗后的玻璃薄片進行氨基化處理是在清洗好的玻璃薄片的兩面上涂覆一層N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液，該N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液的濃度為1％；然后將涂覆N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液的玻璃薄片放置在銅制的玻璃薄片架子上，處理溫度控制在4℃±2℃，時間2小時；所述第三步玻璃薄片進行醛基化處理是在進行氨基化處理后的玻璃薄片的兩面上再涂覆一層戊二醛溶液，進行醛基化處理，該戊二醛濃度為25％；涂覆戊二醛溶液的玻璃薄片放置在銅制的玻璃薄片架子上，處理溫度4℃±2℃，時間3小時，得到醛基化玻璃薄片。

前述的細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法，其中，所述該鉻硫酸溶液的配置為在100ml純化水中溶解重鉻酸鉀8±2g和無煙濃硫酸12±2ml；該鉻硫酸浸泡液是儲存在玻璃燒杯中。

本發(fā)明細胞爬片用玻璃薄片表面的粘附處理方法的有益效果是：可增加細胞爬片的質量，通過醛基與細胞形成共價鍵連接，提高細胞爬片的質量并降低本底背景，且醛基片的處理方法簡便，把玻璃薄片在清洗干凈后，通過1％的N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷進行前處理，溫度4℃±2℃，時間2小時之后繼續(xù)進行25％的戊二醛進行醛基化處理，溫度4℃±2℃、時間3小時，最后用純化水清洗干凈，在潔凈環(huán)境下自然干燥后即可使用。

具體實施方式