[發明專利]制備解淀粉芽孢桿菌發酵肥料的方法及其肥料的應用

在審

• 申請號: 201711303070.4
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108017447A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發明（設計）人: 李莉玲;趙露露;梁振賢;王艷;潘韻
• 申請（專利權）人: 河南邑鴻善成生物技術有限公司
• 主分類號: C05G3/00
• 分類號: C05G3/00;C05G3/04;A01G22/20;A01G22/40;A01C21/00;A01B79/02;C12N15/01;C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 焦作市科彤知識產權代理事務所(普通合伙) 41133
• 代理人: 張莉

本發明公開了一種制備解淀粉芽孢桿菌發酵肥料的方法及其肥料的應用；通過對解淀粉芽孢桿菌進行誘變，篩選出能夠代謝出大量吲哚乙酸的菌株，經固體發酵生產出微生物固態肥料產品。此產品對植物具有不同程度的促生長等作用，尤其是對花生和玉米的促生長更為明顯，同時其作為固態肥料施用時，也可起到防止土壤結塊并有效預防花生根腐病；利用固態肥料進行進一步加工得到的液體肥料，對造成根腐病的尖鐮孢菌和串珠鐮孢菌有明顯的抑菌作用，同時對種子有促發芽生長作用；本發明的制備方法有效地保存活菌數量和產品中富含的生物活性物質，同時有效地避免了肥料中有效營養成分的流失。

技術領域

本發明涉及一種制備解淀粉芽孢桿菌發酵肥料的方法及其肥料的應用，屬于生物發酵技術領域。

背景技術

近百年來，化肥的施用對農業生產做出了巨大的貢獻。但長期過分依賴化學肥料和農藥，造成大量不可再生能源的浪費，農田有機質不足，土壤板結，肥力下降，農作物品質降低，食品和地下水等環境污染狀況日趨嚴重。隨著生態農業和綠色食品生產的興起和發展，固態肥料逐漸引起人們的重視。固態肥料通常指含有活性微生物的肥料產品，當施用于種子、植物表面或土壤中時，能夠定殖在植物根際周圍或寄生于植物內，通過增加營養供應或提高植物吸收營養的能力來促進植株的生長。

目前，市面上的固態肥料產品雖然很多，但其效果良莠不齊。并且市面上的固態肥料價格普遍較高，其經濟效果相比化學肥料，還遠遠不夠。

花生根腐病由半知菌亞門的鐮刀菌侵染所引起。包括尖鐮孢菌、茄類鐮孢菌、粉紅色鐮孢菌、三隔鐮刀菌和串珠鐮孢菌5個菌種，它們都可產生無性態的小孢子、大孢子和厚垣孢子。小孢子卵圓形至橢圓形，無色，多為單胞，大小2-3微米×5-12微米。大孢子鐮刀形或新月形，具3-5個分隔。厚垣孢子近球形，單生或串生，直徑7-11微米。病菌習居土壤中，在土中能存活數年，屬維管束寄生菌，可堵塞導管和分泌毒素而使植株枯萎。

目前預防花生根腐病主要是通過采用化學藥劑進行防控，而化學藥劑的長期使用，會造成水源土壤污染、生態平衡被破壞、農藥殘留、次要病害猖獗和使病源微生物產生抗藥性等一系列的嚴重后果。隨著人們環保意識的增強，對食品安全問題的重視，以及對生態環境建設，保護生物多樣性和農業可持續發展的要求，使得生物防控土傳病害成為當前研究和開發的熱點。

發明內容

為了克服上述缺陷，本發明公開了一種制備解淀粉芽孢桿菌發酵肥料的方法及其肥料的應用。

為了實現上述目的，本發明的技術方案是：一種制備解淀粉芽孢桿菌發酵肥料的方法，包括以下步驟：

步驟1）、對解淀粉芽孢桿菌進行誘變，篩選出吲哚乙酸代謝量大于等于75μg/mL的解淀粉芽孢桿菌菌株；

步驟2）、使用篩選出來的解淀粉芽孢桿菌菌株在酵母浸粉胨葡萄糖瓊脂培養基上劃線，30℃培養48h，然后挑取單克隆接種于酵母浸粉胨葡萄糖液體培養基中30℃培養24h，得到種子液；

步驟3）、再將種子液按3%的量接種于解淀粉芽孢桿菌液體發酵培養基中， 30℃，150rpm培養24h，得到發酵液；

步驟4）、發酵液按10%的量接種于固體基質上，30~40℃條件下發酵144h，然后將固體發酵物在50℃下烘干，得到固態肥料；

所述解淀粉芽孢桿菌為保藏地址是廣東省微生物菌種保藏中心廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓GDMCC，保藏編號為GDMCC no:60084，分類命名為Bacillus amyloliquefaciens SC008，保藏時間為2016年9月28日。

優選的，所述固體基質配方為：玉米秸稈70%，豆粕20%，廢糖液10%，終水分含量60%。