[發明專利]一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒

在審

• 申請號: 201711296696.7
• 申請日: 2017-12-08
• 公開（公告）號: CN107884567A
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 李根平
• 申請（專利權）人: 廣州源起健康科技有限公司
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/543;G01N33/577
• 代理公司: 廣州市深研專利事務所44229
• 代理人: 姜若天

技術領域

本發明涉及食品安全檢測領域，具體地說，本發明涉及一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅的試劑盒。

背景技術

克倫特羅（Clenbuterol，CBL）是一種β-腎上腺素受體激動劑，主要以鹽酸鹽形式存在，在飼料中添加克倫特羅，可促進動物生長，抑制脂肪沉積、提高蛋白質含量、增加酮體瘦肉率、改善肉質等作用。因此，近年來在經濟利益的驅使下，不法分子將大量克倫特羅用于畜牧業和養殖業。人體攝入過多的CBL會導致一系列不良反應，主要有肌肉震顫、心跳和呼吸加快等，嚴重的會危及生命。鑒于此，許多國家已經禁止將克倫特羅作為飼料及飼料添加劑使用，我國農業部也于2002 年明確將其列入《禁止在飼料和動物飲用水中使用的藥物品種目錄》，并規定在動物性食品中不得檢出CBL。

目前克倫特羅的檢測方法主要有5種：氣相色譜-質譜聯用法（GC/MS），高效液相色譜法（HPLC），酶連免疫分析法，膠體金免疫層析法、熒光免疫層析法；GC/MS可用于飼料、血液、組織中鹽酸克倫特羅的分析，檢測限為0.5 ppb，與高效液相色譜法相比，檢測靈敏度更高，假陽性率更低。因此，中國、歐盟及美國等國家將氣相色譜-質譜聯用法定為檢測鹽酸克倫特羅的確證性方法。HPLC具有檢測精確度高、假陽性率低的特點，其最低檢測限為1~15ppb，國內已將高效液相色譜法作為檢測鹽酸克倫特羅殘留的半確證性方法。前述兩種檢測方法缺點是檢測過程煩瑣、檢測時間長, 需貴重儀器、難于操作、價格昂貴。酶聯免疫法具有檢測準確、靈敏度高、儀器設備簡單等優點，但檢測時間長、操作繁瑣不能實現現場快速檢測。膠體金和熒光免疫層析試劑具有操作簡便、快速、試劑安全、不需要特殊儀器和設備等優點，但存在準確度不高，靈敏度低等缺點。

發明內容

本發明的目的在于克服上述技術缺陷，提供一種成本低廉、操作簡單、準確、靈敏的磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒。

為實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

一種磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒，包括BSA-CBL包被磁珠、熒光物質標記CBL抗體、洗滌液、增強液和克倫特羅標準品溶液。

在上述的磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒中，所述的BSA-CBL包被磁珠為帶有官能團修飾的直徑1~3μm的超順磁珠與蛋白的共價偶聯物，所述磁珠為羧基磁珠、氨基磁珠、羥基磁珠、甲苯磺酰基磁珠、NHS磁珠、鏈酶親和素磁珠、蛋白A磁珠、蛋白G磁珠、抗小鼠IgG磁珠、親水磁珠、疏水磁珠中的一種或幾種。

在上述的磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒中，所述的熒光物質為鑭系鰲和物。所述的熒光物質為由銪（Eu³⁺）、釤（Sm³⁺）、鋱（Tb³⁺）或鏑（Dy³⁺）等稀土元素組成的螯合物。所述熒光物質的激發波長為300~350nm，發射波長為500~650nm。

在上述的磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒中，所述的洗滌液配方為：0 .8~1 .2% Tween-20，0.05% Proclin300，pH 7.2~7.5 0.05M Tris-Hcl緩沖液。

在上述的磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒中，所述的增強液配方為：0.03%乙酸鈉、0.0001~0.0005%β-NTA、0.0024% TOPO 、0.08%醋酸、0.1%無水乙醇、0.05%的Triton X-100的水溶液。

在上述的磁珠時間分辨熒光免疫定量檢測克倫特羅試劑盒中，所述的克倫特羅標準品溶液共6瓶，濃度分別為0μg/L、0.1μg/L、0.3μg/L、0.9μg/L、2.7μg/L、8.1μg/L。