[發明專利]一種基于干血斑樣本的百草枯定性定量檢測方法

有效

• 申請號: 201711295466.9
• 申請日: 2017-12-08
• 公開（公告）號: CN108152391B
• 公開（公告）日: 2021-01-12
• 發明（設計）人: 文迪;馬春玲;楊楊;向平;于峰
• 申請（專利權）人: 河北醫科大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 郝曉紅

本發明涉及一種基于干血斑樣本的百草枯定性定量檢測方法，其特征在于：用干血斑法對樣品進行前處理，用高效液相色譜/質譜聯用分析法進行檢測。本發明不需要大量采血、侵襲性較小，不需要離心分離血液、操作時間短，受艾滋病毒、乙型和丙型肝炎病毒等血源性傳播病毒的干擾小、檢出限低，并且干血斑允許樣品在室溫下穩定運輸和儲存，便于在取樣地以外的地點或在其他時間進行復檢。

技術領域

本發明關于生物檢測技術領域，尤其涉及一種基于干血斑樣本的百草枯定性定量檢測方法。

背景技術

百草枯是一種對人類和動物均有劇毒的化合物，是人類急性中毒死亡率最高的除草劑，百草枯中毒導致高發病率和死亡率，且無特效藥，口服中毒死亡率可以達到90％以上。隨著百草枯等除草劑中毒病例的增多，該類毒物的定性、定量檢測具有重要意義。可靠且高效的樣品前處理方法是整個檢測過程的首要環節，同時也是耗時最多的部分，占整個檢測過程大約80％的時間。目前用于百草枯中毒血液樣品預處理的方法主要為蛋白沉淀法、液液萃取和固相萃取(Solid-Phase Extraction，SPE)法等，然而這些預處理方法因血液基質的復雜性和樣品的難保存性存在所需樣本量大、操作繁復、回收率低、操作時間長、檢出限(limit of determination，LOD)高等缺陷，當應用于法醫毒物類案件鑒定時，現有方法需要對樣品進行冷藏運輸和儲存，且易受其他血源性傳播病毒的干擾。因此，選擇高效、簡單的樣本制備方法和前處理過程，從而高效且精確地對血液中百草枯、敵草快等除草劑類藥物進行定性和定量勢在必行。

發明內容

針對現有技術中對百草枯中毒血液樣品的預處理方法所需樣本量大、操作繁復、回收率低、操作時間長、檢出限高的技術問題，本發明提供了一種基于干血斑樣本的百草枯定性定量檢測方法。

為達到上述發明目的，本發明實施例采用了如下的技術方案：

一種基于干血斑樣本的百草枯定性定量檢測方法，用干血斑法對樣品進行前處理后再進行檢測。

相對于現有技術而言，本發明使用了干血斑(dried blood spot，DBS)法，不需要大量采血、侵襲性較小，不需要離心分離血液、操作時間短，受艾滋病毒、乙型和丙型肝炎病毒等血源性傳播病毒的干擾小、檢出限低，并且干血斑允許樣品在室溫下穩定運輸和儲存，便于在取樣地以外的地點或在其他時間進行復檢。

附圖說明

圖1為百草枯多反應監測色譜圖；

圖2為內標乙基百草枯多反應監測色譜圖；

圖3為百草枯二級質譜圖；

圖4為內標乙基百草枯二級質譜圖；

圖5為百草枯標準曲線。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合具體實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

本發明實施例提供一種基于干血斑樣本的百草枯定性定量檢測方法，用干血斑法對樣品進行前處理后再進行檢測。

相對于現有技術而言，本發明不需要大量采血、侵襲性較小，不需要離心分離血液、操作時間短，受其他血液性傳播病毒的干擾小、檢出限低，并且干血斑允許樣品在室溫下穩定運輸和儲存，便于在取樣地以外的地點或在其他時間進行復檢。

進一步地，本發明還提供基于干血斑樣本的百草枯定性定量檢測方法的步驟：

步驟a、將待測血液制成干血斑；

步驟b、定量采取步驟a所得干血斑，提供內標物，將所述干血斑和所述內標物溶解后得待測溶液；