[發明專利]一種重組柯薩奇病毒B3的構建及其在抗腫瘤中的應用

在審

• 申請號: 201711287806.3
• 申請日: 2017-12-07
• 公開（公告）號: CN107951908A
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發明（設計）人: 蔡立剛
• 申請（專利權）人: 武漢博威德生物技術有限公司
• 主分類號: A61K35/76
• 分類號: A61K35/76;A61K49/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司31253
• 代理人: 馮子玲

技術領域

本發明涉及生物科學技術領域，尤其涉及一種重組柯薩奇病毒B3的構建及其在抗腫瘤中的應用。

背景技術

柯薩奇病毒(Coxsackievirus)是一種腸病毒(enterovirus)分為A和B兩類，是一類常見的經呼吸道和消化道感染人體的病毒，感染后人會出現發熱、打噴嚏、咳嗽等感冒癥狀。

柯薩奇A9是一種常見致病病原體，常在夏季流行，常伴發腦膜炎及肺部損害，皮疹常見，但無特異性，可為散在性紅斑、斑丘疹，初起于面頸部，后逐漸蔓延到軀干及上肢及掌跖。一般持續1-7d，可有短期發熱，在出疹時則熱退，并可發生水痘綜合征，即高熱3-4d，然后在紅斑基礎上發生1-2mm大小的水皰，呈向心性分布，皮疹不結痂。亦可伴發皰疹性咽峽炎，局部淋巴結腫大。此外亦可發生蕁麻疹及紫癜，在病人咽喉分泌物、腦脊液、大便及血液中可分離此病毒。

柯薩奇病毒B型感染引起特征性傳染性胸肋痛即所謂Bornholm′s病。可合并腦膜腦炎、心肌炎、發燒、Guillain-Ba-rré綜合征、肝炎、溶血性貧血和肺炎。因此構建動物模型對于研制科薩齊病毒疫苗具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有技術中存在的缺點，而提出的一種重組柯薩奇病毒B3的構建及其在抗腫瘤中的應用。

為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

設計一種重組柯薩奇病毒B3的構建，將所述重組科薩奇病毒B3定量后接種實驗動物，從而構建得到感染動物模型。

優選的，所述的實驗動物為鼠類，優選為白鼠、乳鼠，日齡為30-45天。

優選的，接種方法為接觸傳播、空氣傳播、口服、靜脈注射病毒接種、皮下注射或粘膜給藥，并優選為空氣傳播或靜脈注射。

優選的，重組柯薩奇病毒B3的接種量為1000copies/ml的純化病毒懸液0.4-0.7ml。

優選的，病毒接種后，每隔10-15天收集實驗動物的血液樣本。

優選的，用RT_PCR方法測定體液和組織內的病毒載量。

優選的，在接受病毒接種后，用活檢方法取淋巴結，福爾馬林固定，石蠟包埋，常規病理組織切片處理后，染色，鏡檢。

優選的，感染試驗動物后飼養2-3個月并處死，并抽血、收集臟器對模型進行評估。

優選的，一種重組柯薩奇病毒B3的構建，應用于抗腫瘤技術。

本發明提出的一種重組柯薩奇病毒B3的構建及其在抗腫瘤中的應用，有益效果在于：本發明小鼠模型構建過程相對簡單，技術手段相對容易，構建成本低，不像轉基因小鼠及嵌合體小鼠那樣對技術要求高，構建過程復雜且成本高，所以本小鼠模型更易推廣應用。

具體實施方式

下面對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。

實施例1

一種重組柯薩奇病毒B3的構建，將重組科薩奇病毒B3定量后接種實驗動物，從而構建得到感染動物模型。

的實驗動物為鼠類，優選為白鼠、乳鼠，日齡為30天。

接種方法為接觸傳播、空氣傳播、口服、靜脈注射病毒接種、皮下注射或粘膜給藥，并優選為空氣傳播或靜脈注射。

重組柯薩奇病毒B3的接種量為1000copies/ml的純化病毒懸液0.4ml。

病毒接種后，每隔10天收集實驗動物的血液樣本。

用RT_PCR方法測定體液和組織內的病毒載量。

在接受病毒接種后，用活檢方法取淋巴結，福爾馬林固定，石蠟包埋，常規病理組織切片處理后，染色，鏡檢。

感染試驗動物后飼養2個月并處死，并抽血、收集臟器對模型進行評估。

一種重組柯薩奇病毒B3的構建，應用于抗腫瘤技術。

實施例2

一種重組柯薩奇病毒B3的構建，將重組科薩奇病毒B3定量后接種實驗動物，從而構建得到感染動物模型。

的實驗動物為鼠類，優選為白鼠、乳鼠，日齡為35天。

接種方法為接觸傳播、空氣傳播、口服、靜脈注射病毒接種、皮下注射或粘膜給藥，并優選為空氣傳播或靜脈注射。

重組柯薩奇病毒B3的接種量為1000copies/ml的純化病毒懸液0.5ml。

病毒接種后，每隔12天收集實驗動物的血液樣本。

用RT_PCR方法測定體液和組織內的病毒載量。

在接受病毒接種后，用活檢方法取淋巴結，福爾馬林固定，石蠟包埋，常規病理組織切片處理后，染色，鏡檢。