[發明專利]一種L?色氨酸的發酵生產工藝

在審

• 申請號: 201711281076.6
• 申請日: 2017-12-07
• 公開（公告）號: CN107937452A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發明（設計）人: 徐慶陽;陳寧;劉子強;李燕軍;范曉光;謝希賢;徐達;張成林;馬倩
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12P13/22
• 分類號: C12P13/22;C12R1/19
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司12107
• 代理人: 李蕊

1.一種L-色氨酸的發酵生產工藝，其特征在于：步驟如下：

(1)將菌種擴培接到種子罐中進行種子培養，培養時間為10±2h，在此期間將并聯設置的兩個發酵罐空消，滅菌條件為120℃、20min，再加入液體培養基實消，滅菌條件為115℃、15min；

(2)待菌液菌體濃度OD₆₀₀≥10后接入已實消好的所述兩個發酵罐中開始發酵，其中接菌量為10％，這時需要將第三個發酵罐進行空消，在溫度還未下降時通入無菌空氣，保持該發酵罐處于正壓狀態；

(3)當發酵中期裝填系數超過發酵罐容積的80％后，將兩個并聯發酵罐中三分之一料液經過無菌管道利用壓力差打入第三個滅菌的空的發酵罐中完成分罐操作，三個發酵罐所流加的糖濃度均采用40％的稀糖繼續發酵至結束。

2.根據權利要求1所述的L-色氨酸的發酵生產工藝，其特征在于：所用菌種為L-色氨酸工程菌Escherichia coli TRTH。

3.根據權利要求1所述的L-色氨酸的發酵生產工藝，其特征在于：所述斜面培養基成分為(g/L)蛋白胨0.1、酵母粉0.05、牛肉膏0.1、氯化鈉0.025、瓊脂0.25、麥芽糖0.05；所述發酵培養基成分為(g/L)葡萄糖10、酵母粉2、一水合檸檬酸2、硫酸銨1.6、磷酸氫二鉀7.5、七水合硫酸鎂2、七水合硫酸亞鐵0.075、維生素B族混合物0.1ml/L、微量元素混合物1ml/L。

4.根據權利要求3所述的L-色氨酸的發酵生產工藝，其特征在于：所述維生素B族混合物含維生素B₁、B₃、B₅、B₇、B₁₂各2mg/ml。

5.根據權利要求3所述的L-色氨酸的發酵生產工藝，其特征在于：所述微量元素混合物中成分及比例按g/L計：鉬酸銨0.28，硼酸5，CoCl₂·6H₂O 1.4，MnSO₄·H₂O 0.5，CuSO₄·7H₂O 0.5，ZnSO₄·H₂O 0.6，Na₂SO₄ 5。

6.根據權利要求1所述的L-色氨酸的發酵生產工藝，其特征在于：所述分罐操作全程均采用40％的稀糖流加控糖發酵。