[發(fā)明專利]一種抗原檢測材料及其制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711278878.1
• 申請日: 2017-12-06
• 公開（公告）號: CN108163802B
• 公開（公告）日: 2020-02-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊春江;李瑞萱
• 申請（專利權(quán)）人: 北京納百生物科技有限公司
• 主分類號: B81C1/00
• 分類號: B81C1/00;G01N33/543;G01N33/551;G01N33/576
• 代理公司: 44525 深圳邁遼知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 賴耀華

本發(fā)明提供一種抗原檢測材料的制備方法，包括以下步驟：首先采用電化學刻蝕方法制備微米多孔硅基底，然后對多孔硅基底進行表面修飾，使其組裝分別含有疏水長碳和具有反應性端基的兩種硅烷的復合單層膜，最后將特定抗體接枝到經(jīng)過修飾的多孔硅基底材料表面生成復合單分子層，使該表面成為一種結(jié)合有特定抗體的超疏水生物功能表面。本發(fā)明制備的超疏水生物功能化的多孔硅材料可以用來檢測抗原疾病，其原理是該含有抗體的材料表面可與含有抗原的液體發(fā)生作用產(chǎn)生粘附力，通過檢測其對待檢測樣品液滴粘附力的有無及大小來判斷待測樣品中是否含有某種特定的疾病抗原。本發(fā)明中涉及的檢測材料制備工藝簡單，檢測過程方便，具有很高的實際應用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種多孔硅基底表面修飾的方法，具體地說，是通過對多孔硅基底表面進行修飾使該表面成為一種結(jié)合有特定疾病抗體的超疏水生物功能表面，利用其超疏水性和生物功能該材料可用來快速檢測待測樣品中是否含有特定的疾病抗原。

背景技術(shù)

硅材料在作為生物傳感器、生物芯片等研究中有廣泛的應用，可以用來作為生物傳感器，在抗原或抗體檢測方面，常見的方法是通過在多孔硅基材表面接枝抗原/抗體，當檢測樣品中的抗體/抗原與其結(jié)合時，會改變多孔硅薄膜的折光率，從而產(chǎn)生響應信號實現(xiàn)對抗體的傳感。基于多孔硅的檢測方法包括：反射光譜的檢測和拉曼、熒光光譜的檢測，前兩者都是非標記生物檢測技術(shù)中常用的方法。

專利CN 103979543 A公開了一種多孔硅的修飾方法及其作為生物傳感器的用途，該修飾方法包括以下步驟：首先通過電化學刻蝕方法制備多孔硅，刻蝕液為氫氟酸：無水乙醇體積比為3:1；然后將得到的多孔硅進行烷氧基硅烷修飾；最后與4-(二乙氨基)水楊醛反應，得到帶有芳叔胺基團的多孔硅。并且指出該修飾過的多孔硅可以作為生物傳感器用于光學非標記生物檢測各種可溶性受體分子。但該類方法所制備的材料在用于生物檢測時，通常檢測情況下拉曼信號較弱。

專利CN 103116019 A公開了一種免疫基底的制備方法及抗原或抗體的免疫檢測方法，該免疫基底的制備方法利用金或銀納米粒子修飾硅片，再在金或銀納米粒子表面修飾抗體/抗原，用于捕獲待測抗原/抗體，利用了金或銀納米粒子的表面增強拉曼散射效應，大大提高了免疫檢測的靈敏度，彌補了通常檢測情況下拉曼信號較弱的缺點，并且可進行高通量的多抗原或多抗體檢測。

專利CN 104726927 A公開了一種硅基仿生微納結(jié)構(gòu)超疏水表面的制備方法：首先通過電化學刻蝕制備多孔硅薄膜，獲得多孔硅仿生微納結(jié)構(gòu)表面，然后以濃硫酸和雙氧水處理使其表面羥基化，最后用長鏈硅烷R-SiX₃(R＝C_nH_2n+1，n＝8、9、10…20，X＝Cl，OCH₃，OC₂H₅)修飾，或多巴胺接枝。相對于復雜、耗時、成本較高的光刻技術(shù)，該方法簡單、高效、成本較低。

目前已知的硅基材料在用于生物檢測方面，一般是通過對其光學特性的改變進行檢測來實現(xiàn)其生物檢測功能的，這種間接的檢測方式存在著一定的限制，并且一些檢測材料的制備方法較為復雜和不易控制。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明目的是提供一種對多孔硅基底表面的修飾方法，并將其應用于對疾病抗原的檢測。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的所采取的技術(shù)方案為：

一種抗原檢測材料的制備方法，該材料以多孔硅為基底材料，所述材料的制備過程包括以下步驟：

(1)用電化學刻蝕方法制備微米多孔硅基底；