[發明專利]一種非酒精性慢性脂肪性肝炎大鼠模型及其構建方法和用途

有效

• 申請號: 201711277910.4
• 申請日: 2017-12-06
• 公開（公告）號: CN107801691B
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 楊祖經;陳繼巧;涂小蝶;莊永杰
• 申請（專利權）人: 凱斯艾生物科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A23K20/142;A23K20/158;A23K20/163;A23K20/20;A23K50/50;A61K33/00;A61K49/00
• 代理公司: 南京艾普利德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32297
• 代理人: 陸明耀

本發明涉及生物技術領域，公開了一種非酒精性慢性脂肪性肝炎（NASH）大鼠模型及其構建方法和用途。對成年大鼠飼喂蛋氨酸和膽堿缺乏的特殊飼料（MCD飼料）或膽堿缺乏的特殊高脂飼料（CDAA飼料），一定時間內給與動物一定量的亞硝酸鈉溶液，構建得到非酒精性慢性脂肪性肝炎大鼠模型具有慢性肝纖維化和早期肝硬化特點。本發明所提供的大鼠模型構建過程簡單，技術手段容易，構建成本低，具有極高的科研和藥物研發所需的動物模型的價值，特別是作為在NASH伴有嚴重性肝纖維化和早期肝硬化階段的特定動物模型，屬于國內首創。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及一種非酒精性慢性脂肪性肝炎大鼠模型及其構建方法和用途。

背景技術

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fattyliver disease， NAFLD)是為臨床常見的肝臟疾病之一， 其中非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis， NASH)是非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver， NAFL)向非酒精性脂肪性肝硬化轉化過程中一個非常重要的環節，是隱源性肝硬化的重要原因之一。研究表明，NASH 的預后不佳，約 50%的 NASH 患者隨訪 6 年后可進展成肝纖維化，10%-15%在10-20 年內可進展成肝硬化，而9%-26%在隨訪的 4-10 年內可因終末期肝病死亡。因此，研究NASH 的防治策略是目前國內外肝病界的熱點之一。

NASH 的發病機制至今尚不完全清楚，需要通過大量的動物實驗開展深入的研究。然而，目前國內外的 NASH 動物模型雜亂不一，缺少統一的標準，在一定程度上限制了NASH 病理機制及治療藥物的深入研究。非酒精性脂肪性肝炎(NASH)動物模型在探索疾病的發病機 制、評價診斷方法、篩選防治藥物等領域均有重要作用。

近年來，許多學者利用實驗動物復制非酒精性脂肪性肝炎病理模型并對其進行了大量的研究。目前國內外常用的非酒精性脂肪性肝炎動物模型，包括營養失調性、藥物中毒性、特殊品系及復合因素誘導的脂肪肝模型。營養失調性脂肪肝動物模型是國內外最常用的非酒精性脂肪性肝炎動物模型，包括高脂飲食脂肪肝動物模型、高糖飲食脂肪肝動物模型和膽堿-蛋氨酸缺乏脂肪肝動物模型。用基因模型和營養模型)，其中蛋氨酸-膽堿缺乏(methionine-choline-deficient，MCD)飲食誘發的 NASH 模型是國際上被廣泛認可的動物模型，操作簡便，成模率高，成為研究 NASH 發病機制及防治藥物的主要動物模型。

如 CN200710066801.8 公開了一種非酒精性脂肪性肝病小鼠模型的構建方法。將C57BL/6 小鼠使用膽堿和蛋氨酸缺乏飼料喂養1-8 周并評價相應組別小鼠的成模情況。《蛋 氨酸-膽堿缺乏飲食誘導的非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型的建立及動態監測》（世界華人消 化雜志 2011 年 4 月 18 日; 19(11): 1122-1129）研究了蛋氨酸-膽堿缺乏(MCD)飲食誘導的 非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝臟脂肪變性及炎癥發生、發展的病理特點。然而，現有技術下已有的MCD 飲食誘導的NASH 動物模型肝纖維化程度較輕，未能體現出進展性肝纖維化或肝硬化的病理進程。由于NASH 伴有肝纖維化、肝硬化是該疾病研究和治療的核心點，現有 技術下的動物模型不能很好地模擬實際臨床中的疾病病理特點，無法滿足NASH 研究和治療的要求。同時，現有技術下MCD 誘導的小鼠模型均出現嚴重的動物體重下降，在試驗周期內體重下降達到或接近 40%，嚴重違反了實驗動物福利原則，動物模型存在很大缺陷。基于生物大分子藥物的開發，對于新的非酒精性脂肪性肝炎需求與日俱增，藥物研發市場急需能夠解決上述模型問題的新的實驗動物疾病模型。

發明內容

本發明針對現有技術不足，鑒于以上所述現有模型的缺點，本發明的目的在于提供一種模擬人類NASH 的大鼠模型的構建方法及其用途，并進一步提供由所述的大鼠模型的 構建方法構建獲得的大鼠模型及其用途。本發明對成年大鼠給予特定的蛋氨酸、膽堿缺乏的特殊飼料，以及一定劑量的亞硝酸鈉誘導動物肝組織脂肪變、炎癥病變以及加重肝細胞 凋亡產生NASH 的基本病理過程，特別是出現顯著的肝纖維化和早期肝硬化的病理改變。