[發明專利]EB病毒miR-BART10-5p抑制劑的應用

有效

• 申請號: 201711277063.1
• 申請日: 2017-12-06
• 公開（公告）號: CN108272815B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 李欣;呂曉明;王建國
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學深圳醫院
• 主分類號: A61K31/7105
• 分類號: A61K31/7105;A61P35/00;A61P35/04;A61P11/02;A61P11/04
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

本發明公開了EB病毒miR?BART10?5p抑制劑的應用。本發明利用微管形成實驗和雞胚絨毛尿囊膜實驗分析發現，在鼻咽癌細胞中呈高度表達的EB病毒miR?BART10?5p能明顯促進鼻咽癌血管新生。本發明的EB病毒miR?BART10?5p抑制劑是以EB病毒miR?BART10?5p的反義寡核苷酸為基礎，經過系列修飾獲得的，通過微管形成實驗、雞胚絨毛尿囊膜實驗及基質膠栓實驗，證實了EB病毒miR?BART10?5p抑制劑能夠明顯抑制鼻咽癌新生血管的生成的作用，具有治療鼻咽癌效果，進一步的，還可以應用于防治鼻咽癌的復發和轉移。

技術領域

本發明屬于腫瘤分子生物學領域，更具體地，涉及EB病毒miR-BART10-5p抑制劑的應用。

背景技術

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是指發生于鼻咽粘膜的惡性腫瘤，多發于中年人，偶見于青少年，惡性程度高，是頭頸部腫瘤中復發率和轉移率最高的疾病，早期即可出現頸部淋巴結轉移且轉移率高達80％，常高發于中國的華南地區和東南亞等地，具有明顯地域性。鼻咽癌患者治愈后5年內仍有20～30％患者出現鼻咽癌的復發和轉移，是臨床上導致死亡的主要因素之一，目前臨床治療鼻咽癌的主要手段是手術、放療和化療，盡管當前治療水平有了很大的提高，但鼻咽癌5年生存率仍然只有50％左右，因此亟待開發更多的治療方法，能夠輔助放化療進一步提高鼻咽癌患者的生存率。

EB病毒(Epstein Barr virus,EBV)是一種γ皰疹病毒，幾乎所有的未分化和低分化鼻咽癌都與EB病毒潛伏性感染有關。近來研究發現EB病毒編碼的miRNA可參與調控EB病毒編碼的基因和人宿主基因的表達，例如，EBV-miR-BART2能與編碼病毒DNA聚合酶的基因BALF5的3’UTR完全互補。在裂解感染期病毒大量復制時，miR-BART2表達水平降低，對BALF5基因的分解作用減弱，有利于病毒復制循環；隨著miR-BART2選擇壓力變化，BALF5表達降低，EBV感染細胞釋放的病毒顆粒不斷減少，感染進入潛伏狀態(Nucleic Acids Res 310:1035-48,2009)。EBV-miR-BHRF1-3與細胞IFN誘導的T細胞趨化因子CXCL-11/I-TAC的表達水平相關，推測CXCL-11/I-TAC是miR-BHRF1-3作用靶點，EB病毒可以此作為調節方式來干擾宿主的免疫監視和免疫清除作用(Cancer Res 68:1436-42,2008)。EBV-miR-BART5能通過抑制宿主的凋亡前蛋白PUMAHl，上調P53的表達，如果從EBV感染的細胞中去除miR-BART5，將促進PUMA介導的凋亡作用，提示EBV能夠抑制凋亡的發生，從而保護其感染的上皮細胞(J Exp Med 205:2551-60,2008；J Biol Chem 285:33358-100,2010)。miR-BART6-5p能抑制EBNA2病毒癌基因的表達，而這種癌基因的表達在I型和II型潛伏狀態(免疫低反應)向III型潛伏狀態(免疫高反應)轉化的過程中是不可缺少的，表明miR-BART6在EBV的感染和潛伏中發揮重要的調節作用(J Biol Chem 285:33358-100,2010)。由此可見，EB病毒miRNA一方面可作用于病毒本身的靶基因，促進病毒的感染和潛伏，另一方面也可以作用于宿主的靶基因,促進病毒逃避宿主細胞的免疫反應，并抑制宿主細胞的凋亡。

然而，有關EB病毒編碼的miR-BART10的作用及機制的研究較少，其中CN105154446A和CN105154586A共同公開了EB病毒編碼的microRNA BART10及其反義寡核苷酸的應用方法，研究證實鼻咽癌組織中EBV-miR-BART10的表達水平與鼻咽癌患者的淋巴結轉移及遠處轉移呈正相關關系；我們對此專利的序列比對，發現其涉及的實際是EBV-miR-BART10-3p。還有研究指出，EBV-miR-BART10-3p可通過靶向BTRC基因能夠促進鼻咽癌EMT的發生進而促進鼻咽癌的轉移(Oncotarget 39:41766-41782)。然而，迄今為止，有關EB病毒miR-BART10與鼻咽癌血管生成的關系未見任何報道。