[發明專利]選擇性識別蛋白質的紙基雙印跡材料及制備方法與應用

有效

• 申請號: 201711275084.X
• 申請日: 2017-12-06
• 公開（公告）號: CN108084337B
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發明（設計）人: 荊濤;汪秀;黃凱;梅素容;周宜開
• 申請（專利權）人: 華中科技大學
• 主分類號: C08F220/56
• 分類號: C08F220/56;C08F222/38;C08J9/26;B01J20/26;B01J20/291;G01N21/78
• 代理公司: 華中科技大學專利中心 42201
• 代理人: 許恒恒;李智

1.一種選擇性識別蛋白質的紙基雙印跡材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)氧化石墨烯-血晶素復合物在濾紙材料表面的固定

(1-1)運用負壓將氧化石墨烯-血晶素復合物固定在濾紙材料表面；

(2)紙基雙印跡材料的制備

(2-1)將功能單體丙烯酰胺、模板蛋白質和模板3,3',5,5'-四甲基聯苯胺溶解在磷酸鹽緩沖溶液中，充分混勻后，20℃-37℃孵育10min-30min；所述的丙烯酰胺、模板蛋白質和模板3,3',5,5'-四甲基聯苯胺的物質的量之比為(7428-37141)：1：(1098-5492)；

(2-2)將步驟(1-1)制備得到的表面固載有氧化石墨烯-血晶素復合物的濾紙材料加入到步驟(2-1)所得的溶液中，加入交聯劑N,N-亞甲基雙丙烯酰胺，并加入過氧化氫和乙酰丙酮，在20℃-37℃下避光聚合12h-24h；所述的N,N-亞甲基雙丙烯酰胺、過氧化氫和乙酰丙酮的物質的量之比為1:(99-512):(1-12)；

(2-3)將步驟(2-2)所得濾紙材料用洗脫液洗去模板蛋白質和模板3,3',5,5'-四甲基聯苯胺后，得到選擇性識別模板蛋白質和模板3,3',5,5'-四甲基聯苯胺的紙基雙印跡材料。

2.如權利要求1所述的選擇性識別蛋白質的紙基雙印跡材料的制備方法，其特征在于，步驟(2-1)中所述的功能單體丙烯酰胺用于提供乙烯雙鍵、氨基和酰胺基團與模板蛋白質和模板3,3',5,5'-四甲基聯苯胺聚合反應，形成模板蛋白質和模板3,3',5,5'-四甲基聯苯胺的空間立體結構。

3.如權利要求1所述的選擇性識別蛋白質的紙基雙印跡材料的制備方法，其特征在于，步驟(2-1)中的功能單體丙烯酰胺在氧化石墨烯-血晶素復合物和過氧化氫以及乙酰丙酮的引發作用下，發生乙烯雙鍵的斷裂加成反應，并在交聯劑N,N-亞甲基雙丙烯酰胺的作用下，交聯形成多聚物。

4.如權利要求1所述的選擇性識別蛋白質的紙基雙印跡材料的制備方法，其特征在于，步驟(1-1)所述的氧化石墨烯-血晶素復合物具有過氧化物酶樣活性，用于催化3,3',5,5'-四甲基聯苯胺顯色作為檢測信號。

5.一種選擇性識別蛋白質的紙基雙印跡材料，其特征在于，由權利要求1-4任一方法制備得到。

6.如權利要求5所述的選擇性識別蛋白質的紙基雙印跡材料的應用，其特征在于，該紙基雙印跡材料用于蛋白質的選擇性識別或蛋白質的定量檢測。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于，所述紙基雙印跡材料在選擇性識別蛋白質之后，向反應體系中加入3,3',5,5'-四甲基聯苯胺和過氧化氫，3,3',5,5'-四甲基聯苯胺競爭結合雙印跡殘留位點，氧化石墨烯-血晶素的過氧化物酶樣活性催化過氧化氫釋放自由基，3,3',5,5'-四甲基聯苯胺結合自由基并呈現藍色，根據顏色的灰度值計算出蛋白質的濃度。

8.如權利要求6或7所述的應用，其特征在于，該紙基雙印跡材料用于甲狀腺球蛋白質的選擇性識別或甲狀腺球蛋白質的定量檢測。