[發明專利]一種快速、簡單的植物基因組DNA提取方法在審
| 申請號： | 201711274541.3 | 申請日： | 2017-12-06 |
| 公開（公告）號： | CN108795924A | 公開（公告）日： | 2018-11-13 |
| 發明（設計）人： | 陳曉軍;樊云芳;王敬東;李樹華;宋海麗 | 申請（專利權）人： | 寧夏農林科學院 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 750002 寧夏回族*** | 國省代碼： | 寧夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 植物基因組DNA 棉簽 洗脫 脫脂棉 分子生物學實驗 基因型鑒定 浸入 基因組DNA 化學試劑 基因克隆 快速提取 提取植物 植物組織 離心機 植物DNA 材料量 刺激味 粗提液 清洗液 漂洗 測序 混勻 可用 氯仿 打碎 浸潤 改良 新鮮 環保 | ||
1.一種改良DNA裂解緩沖液，每1000ml所述DNA提取緩沖液中，含有十二烷基硫酸鈉鈉(SDS)0.6g。
2.根據權利要求1所述的DNA提取緩沖液，其特征在于，每1000ml所述DNA提取緩沖液中還含有Tris-HCl 200mmol、NaCl 250mmol、EDTA 25mmol。
3.一種改良DNA清洗液，每1000ml所述DNA清洗液中，含有吐溫-20 15g。
4.根據權利3所述的DNA清洗液，其特征在于，每1000ml所述DNA清洗液中還含有Tris-HCl 200 mmol。
5.根據權利要求1所述的DNA提取緩沖液和權利要求3所述的DNA清洗液，其特征在于，所述Tris-HCl的pH為8.0。
6.根據權利要求1所述的DNA提取緩沖液和權利要求3所述的DNA清洗液在植物基因組DNA提取中的用途。
7.一種植物DNA提取方法，所述方法采用前述改良DNA提取緩沖液和清洗液來提取植物基因組DNA。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：(1)將新鮮的植物組織裝入圓底EP管中，放中一粒鋼珠將其打碎，加入改良DNA裂解液，混勻；(2)用干凈脫脂棉簽，將其浸入步驟(1)中的DNA的粗提液3s，將浸潤的棉簽迅速在DNA清洗液中輕輕漂洗3次；(3)然后將棉簽在100μLTE或ddH2O溶解徹底洗脫3-5次，洗脫過的溶液即DNA溶液。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述植物組織為植物的葉片。
10.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述棉簽可以用濾紙(Whatman GF/A)玻璃纖維或棉纖維等吸附材料之一所替代。
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