[發明專利]從雙孢菇提取酪酸氧化酶的生產工藝

在審

• 申請號: 201711273361.3
• 申請日: 2017-12-06
• 公開（公告）號: CN109880808A
• 公開（公告）日: 2019-06-14
• 發明（設計）人: 程淑清;牛清玲
• 申請（專利權）人: 陜西修風生物科技有限公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種從雙孢菇提取酪酸氧化酶的生產工藝及其產品，屬于農產品深加工技術領域。其特征是以酵母菌為菌種，以雙孢菇為原料，經打漿、酶解、液體深層發酵、分離、濃縮、干燥等工藝，制備高純度的酪酸氧化酶，本法工業化程度高，生產成本低，獲得在食品及醫藥中具有廣泛應用價值的酪酸氧化酶。

技術領域

本發明涉及農產品加工技術領域，具體涉及從雙孢菇提取酪酸氧化酶的生產工藝。

背景技術

酪酸氧化酶是從雙孢菇中分離純化的一種乙?；?，是以增強T細胞和巨噬細胞功能為主的免疫增強劑，與化療或放療聯用可發揮增效減毒作用。酪酸氧化酶具有免疫增強作用，其機制在體內雖無直接殺傷腫瘤細胞作用，但可通過增強機體的免疫功能而發揮抗腫瘤活性。在體內能使脾臟和腹腔的NK細胞活性增強，誘生干擾素與本品劑量相關，其活性與白細胞介素類或干擾素誘導劑有協同作用。另有證明，在體外本品可增強脫氧胸腺嘧啶核苷的抗艾滋病毒的活性。

目前一般酪酸氧化酶的提取方法是將雙孢菇低溫烘干，研磨，加水，加熱煮沸，抽濾，醇沉，得到的沉淀放在真空干燥器中干燥，得到粗酪酸氧化酶，除蛋白，純化，制備而成，這種方法大量使用有機溶劑，對環境影響很大，為克服現有技術的上述缺點，急需一種提取效率高，無污染的方法。

發明內容

發明目的：為了解決上述問題，本發明的目的在于提供從雙孢菇提取酪酸氧化酶的生產工藝及其產品。

技術方案：本發明的目的是通過如下的方案實現的：

一種從雙孢菇提取酪酸氧化酶的生產工藝，以酵母菌作為發酵菌種，以雙孢菇為原料，經打漿、酶解后得到發酵原液，接種酵母菌發酵，將獲得發酵液過濾、蒸餾濃縮、大孔樹脂精制，真空干燥后制得酪酸氧化酶白色粉末。

上述酪酸氧化酶的生產工藝，(1)發酵培養基制備：取雙孢菇粉碎，過60目篩，與加5-6倍的水混合打漿，用檸檬酸調節pH值為6.0-6.5，按果膠酶與雙孢菇的用量之比為300-450U/kg的比例加入果膠酶，于50℃下保溫2-3h；將果膠酶處理后的雙孢菇漿液調節pH值至6.0，按β-葡萄糖酶與雙孢菇的用量之比為1000U/kg的比例加β-葡萄糖酶，于60℃下保溫3h；而后將雙孢菇漿液調節pH值至5.5-6.0，得發酵培養基，將獲得的培養基加熱滅酶、滅菌；(2)酵母發酵：酵母菌從斜面接種到可溶性固形物質量比為6.0％的麥芽汁培養基中，在28℃-30℃，150r/min條件下培養24h；調節pH值為3.0-3.5，按體積比接種5％-10％酵母種子培養液于發酵培養基中，在28℃-30℃下發酵，第1天每8h攪拌一次，后封缸發酵2-3天，獲得雙孢菇發酵液；(3)酪酸氧化酶提取：過濾酵母發酵液，去殘渣，真空濃縮，大孔樹脂純水洗脫，50℃真空干燥，得到純度＞95％的酪酸氧化酶粉末。

有益效果：

1、本發明所選用的菌種為酵母菌，安全可靠，對多糖破壞小，生產條件容易控制，得到的發酵液雜質少，分離工藝簡單，酪酸氧化酶純度高；

2、本方法工業化程度高，生產成本低。

具體實施方式

以下通過實施例形式，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明，但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。

以下所述果膠酶、β-葡萄糖酶購于無錫酶制劑公司。酵母菌購自安琪酵母股份有限公司，批號為20120521。雙孢菇隸屬于擔子菌綱、傘菌目、口蘑科、雙孢菇屬。

實施例1：(1)發酵培養基制備：取雙孢菇1000g粉碎，過60目篩，與加5-6倍的水混合打漿，用檸檬酸調節pH值為6.0，按果膠酶與雙孢菇的用量之比為300U/kg的比例加入果膠酶，于50℃下保溫2h；將果膠酶處理后的雙孢菇漿液調節pH值至6.0，按β-葡萄糖酶與雙孢菇的用量之比為1000U/kg的比例加β-葡萄糖酶，于60℃下保溫3h；而后將雙孢菇漿液調節pH值至5.5，得發酵培養基，將獲得的培養基加熱滅酶、滅菌；(2)酵母發酵：酵母菌從斜面接種到可溶性固形物質量比為6.0％的麥芽汁培養基中，在28℃℃，150r/min條件下培養24h，調節pH值為3.0，按體積比接種5％酵母種子培養液于發酵培養基中，在28℃℃下發酵，第1天每8h攪拌一次，后封缸發酵2天，獲得雙孢菇發酵液；(3)酪酸氧化酶提?。哼^濾酵母發酵液，去殘渣，真空濃縮，大孔樹脂純水洗脫，50℃真空干燥，得到酪酸氧化酶粉末3.3g，純度為95.8％。