[發明專利]一種厚垣孢普可尼亞菌固體發酵產孢的方法

在審

• 申請號: 201711271092.7
• 申請日: 2017-12-05
• 公開（公告）號: CN107955802A
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發明（設計）人: 石妍;肖順;張紹升;劉國坤
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12N3/00
• 分類號: C12N3/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種厚垣孢普可尼亞菌固體發酵產孢的方法，其特征在于，包括厚垣孢普可尼亞菌菌種活化、發酵液的制備以及固體發酵產孢的步驟；

其中，所述固體發酵產孢中所使用的固體發酵培養基配方以質量百分比為：20~50目玉米粉60%~76%， 20~50目菌草20%~36%，蔗糖1.0%~5.0%，硝酸鈉1.0%~5.0%，氯化鈉 1.0%~5.0%，pH自然。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述固體發酵產孢步驟中所使用的固體發酵培養基配方為：30~50目玉米粉65%~75%，30~50目菌草20%~30%，蔗糖0.75%~3.0%，硝酸鈉0.85%~3.4%，氯化鈉 1.0%~3.0%，pH自然。

3. 根據權利要求1所述的一種厚垣孢普可尼亞菌固體發酵產孢的方法，其特征在于，所述固體發酵產孢步驟中所使用的固體發酵培養基配方為：30目玉米粉67.65%，菌草29.0%，蔗糖1.5%，硝酸鈉0.85% ，氯化鈉 1.0%，pH自然。

4.根據權利要求1所述的一種厚垣孢普可尼亞菌固體發酵產孢的方法，其特征在于，所述厚垣孢普可尼亞菌菌種活化步驟為：將厚垣孢普可尼亞菌菌種接種在PSA斜面培養基上活化，28℃黑暗培養5天。

5.根據權利要求1所述的一種厚垣孢普可尼亞菌固體發酵產孢的方法，其特征在于，所述發酵液的制備方法為：斜面菌種活化后，接種到PSA平板上，28℃黑暗培養5天，用打孔器從平板上菌落邊緣打取φ=10mm菌碟作為接種體，按每100mL培養液接入5個菌碟，培養液為3wt.%蝦殼粉培養液，28℃、150r/min搖床振蕩培養48~72h，即得種子液；將種子液按10%的接種量接種至3wt.%蝦殼粉培養液中，28℃、150r/min搖床振蕩培養48~72h，即得發酵液。

6. 根據權利要求1所述的一種厚垣孢普可尼亞菌固體發酵產孢的方法，其特征在于，所述固體發酵產孢的方法為：組培瓶發酵：30目玉米粉67.65%，菌草29.0%，蔗糖1.5%，硝酸鈉0.85%，氯化鈉 1.0%，pH自然，加入水拌勻，含水量50%，分裝于組培瓶中；每瓶裝10g培養基，用紗布封口，121℃間歇濕熱滅菌30min，降溫后以48~60h的發酵液作為固體發酵的接種體，接種量為0.50 ~1.50mL/g；置于28℃培養箱中靜置培養7天。

7. 根據權利要求1所述的一種厚垣孢普可尼亞菌固體發酵產孢的方法，其特征在于，所述固體發酵產孢的方法為：淺盤發酵：30目玉米粉67.65%，菌草29.0%，蔗糖1.5%，硝酸鈉0.85% ，氯化鈉 1.0% ，pH自然，加入水拌勻，含水量50%，用聚乙烯袋裝好后，121℃間歇濕熱滅菌30min，冷卻后，以48~60h的發酵液作為固體發酵的接種體，接種量為0.50 ~1.50mL/g，將接種后的培養料平鋪于淺盤上，厚度3~5cm，將淺盤置于28℃、濕度為80%以上的條件下，培養10天。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，固體發酵產孢接種時以48h的發酵液作為固態發酵的接種體，接種量為0.50mL/g。