[發明專利]一種基于抑制COX-2活性的中藥組合物檢測方法

在審

• 申請號: 201711268953.6
• 申請日: 2017-12-05
• 公開（公告）號: CN109870432A
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發明（設計）人: 王伽伯;肖小河;賈振華;張海珠;余方榮;葛新建;牛明;馬永剛;王宏濤;田書彥
• 申請（專利權）人: 石家莊以嶺藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;A61K36/78;A61P29/00;A61K33/06;A61K31/045
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 劉元霞

1.一種中藥組合物的檢測方法，其特征在于，所述方法包括：將中藥組合物制備為可檢測的樣品，與環氧化酶(COX)接觸，測定樣品對環氧化酶(COX)的抑制率；

其中，所述中藥組合物由如下原料藥制成：

連翹200-300重量份、金銀花200-300重量份、炙麻黃50-100重量份、炒苦杏仁50-100重量份、石膏200-300重量份、板藍根200-300重量份、綿馬貫眾200-300重量份、魚腥草200-300重量份、廣藿香50-100重量份、大黃30-80重量份、紅景天50-100重量份、薄荷腦5-10重量份、甘草50-100重量份。

2.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括如下步驟：

A)制備中藥組合物樣品溶液和/或對照品溶液；

B)測定樣品溶液和對照品溶液對COX-2酶活力的抑制率。

3.如權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，所述COX-2酶活力的抑制率的測定方法包括如下步驟：

a)向待測溶液中加入COX-2酶，培養一定時間；

b)向待測溶液中加入ADHP和花生四烯酸；

c)顯色，檢測熒光強度；

d)按如下公式計算抑制率，

抑制率％＝(初始活性樣品的熒光強度-待測樣品的熒光強度)/初始活性樣品的熒光強度×100％。

4.如權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，步驟a中COX-2酶用量為500U/mL～1000U/mL。

5.如權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，步驟b中AA經過純化。

6.如權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，步驟c中熒光強度在激發光波長530-540nm，發射波長585-595nm下檢測。

7.如權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，步驟A中所述對照品選自常規抗炎藥物或可用于作為對照品的本發明中藥組合物。

8.如權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述對照品為塞來昔布或羅非昔布。

9.如權利要求8所述的檢測方法，其特征在于，所述對照品溶液濃度為1×10⁵U/mL～2×10⁵U/mL；優選的，所述對照品溶液濃度為1.2×10⁵U/mL。

10.如權利要求2所述的檢測方法，其特征在于該方法包括步驟C：以COX-2酶活力抑制率為指標，計算效價和可信限率；中藥組合物抑制COX-2酶活力的效價不得低于500U·μg^-1，平均可信限率小于25％。