[發(fā)明專利]一種分解纖維素的酵素生產(chǎn)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711258741.X
• 申請日: 2017-12-04
• 公開（公告）號: CN107927324A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曾添
• 申請（專利權(quán)）人: 天津市紡織機械器材研究所
• 主分類號: A23K10/12
• 分類號: A23K10/12;A23K20/189;C12P19/02;C12P13/00;C12P19/34;D06M16/00;A23L29/00
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1.一種分解纖維素的酵素生產(chǎn)方法，其特征在于：所述的生產(chǎn)方法包括用于分解的纖維素酵母菌、FM22培養(yǎng)基、微量元素PMT4、消泡劑、50%甘油、12：1甲醇、0.1%的吐溫-80，所述生產(chǎn)方法經(jīng)重組菌株高密度發(fā)酵及酵素合成誘導(dǎo)制成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分解纖維素的酵素生產(chǎn)方法，其特征在于：所述重組菌株高密度發(fā)酵，利用發(fā)酵罐，對纖維素酵母菌進行液體深層發(fā)酵，將5-10mL重組酵母菌保存液接種至含有100mLYPD液體培養(yǎng)基的500mL錐取形瓶中，適宜溫度28-30℃，以每分鐘轉(zhuǎn)速280，培養(yǎng)至酶標(biāo)儀測定600nm處吸光度值約為6，形成種子液；對發(fā)酵罐進行滅菌，降溫至28-30℃，加入FM22培養(yǎng)基、微量元素PMT4、消泡劑及已準備好的種子液，控制培養(yǎng)液溶解氧含量為30-35%，每分鐘轉(zhuǎn)速600，培養(yǎng)24h；以150mL/h流速流加50% 甘油，持續(xù)4h，每0.5h觀察培養(yǎng)液；溶解氧含量峰值，手動控制培養(yǎng)液溶解氧含量為30-35%，添加甘油過程中應(yīng)持續(xù)緩慢，以確保甘油不積累。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分解纖維素的酵素生產(chǎn)方法，其特征在于：所述酵素合成誘導(dǎo)，甘油流盡時，以3mL/h流速流加12：1甲醇和微量元素PMT4，并加入0.1%的吐溫-80，控制每分鐘轉(zhuǎn)速800，培養(yǎng)液溶解氧含量30-35%，適宜溫度28-30℃，進行發(fā)酵；發(fā)酵期間，每隔12h取樣。