[發明專利]一種線粒體轉移液及其制備方法

在審

• 申請號: 201711257531.9
• 申請日: 2017-12-01
• 公開（公告）號: CN108004200A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 黃家學;楊萍
• 申請（專利權）人: 佳學基因醫學技術(北京)有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471
• 代理人: 王金寶

1.一種線粒體轉移液，其特征在于，所述線粒體轉移液包括以下組分：緩沖劑、等滲劑、鈣螯合劑、定向耦合促進劑、線粒體活性促進劑和線粒體滲透通道抑制劑。

2.根據權利要求1所述的線粒體轉移液，其特征在于，所述緩沖液為HEPES緩沖液，所述HEPES緩沖液中HEPES的濃度為10-30mmol/L。

3.根據權利要求1所述的線粒體轉移液，其特征在于，所述等滲液為蔗糖溶液，所述蔗糖的濃度為0.8-1.2mol/L。

4.根據權利要求1所述的線粒體轉移液，其特征在于，所述定向耦合促進劑為RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巰基乙胺，所述RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巰基乙胺的濃度為40-60mmol/L。

5.根據權利要求1所述的線粒體轉移液，其特征在于，所述鈣螯合劑為EGTA，所述EGTA的濃度為0.3-0.7mmol/L。

6.根據權利要求1所述的線粒體轉移液，其特征在于，所述線粒體活性促進劑包括谷氨酸、馬來酸、琥珀酸和脫氧腺苷二磷酸；所述谷氨酸的濃度為3-7mmol/L、馬來酸的濃度為3-7mmol/L，琥珀酸的濃度為3-7mmol/L和脫氧腺苷二磷酸的濃度為0.5-1.5mmol/L。

7.根據權利要求1所述的線粒體轉移液，其特征在于，所述線粒體滲透通道抑制劑為Ruo360，所述Ruo360的濃度為0.05-0.15mmol/L。

8.根據權利要求1所述的線粒體轉移液，其特征在于，所述緩沖液為HEPES緩沖液，所述等滲液為蔗糖溶液，所述定向耦合促進劑為RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巰基乙胺，所述鈣螯合劑為EGTA，所述線粒體活性促進劑包括谷氨酸、馬來酸、琥珀酸和脫氧腺苷二磷酸，所述線粒體滲透通道抑制劑為Ruo360；

所述HEPES緩沖液中HEPES的濃度為20mmol/L，所述蔗糖的濃度為0.8-1.2mol/L，所述RETWWETWWTEWSQPRRRRKV-巰基乙胺的濃度為50mmol/L，所述EGTA的濃度為0.5mmol/L，所述谷氨酸的濃度為5mmol/L，馬來酸的濃度為5mmol/L，琥珀酸的濃度為5mmol/L和脫氧腺苷二磷酸的濃度為1mmol/L，所述Ruo360的濃度為0.1mmol/L。

9.權利要求1-8任一所述線粒體轉移液的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

先使用一部分水，將所有組分溶解后，調節pH值至7.0-7.4，并加入剩余部分的水，攪拌均勻即可。

10.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，使用鹽酸或氫氧化鈉溶液將pH值調至7.2；攪拌均勻，然后使用0.25um的濾膜過濾滅菌后放置在4℃的環境中保存。