[發明專利]一種提高類PSE雞胸肉肌原纖維蛋白凝膠品質的糖基化方法

有效

• 申請號: 201711256672.9
• 申請日: 2017-12-04
• 公開（公告）號: CN107821989B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 徐幸蓮;卞光亮;韓敏義;王虎虎;許玉娟;周光宏;邵士昌
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C08L89/00
• 分類號: C08L89/00;C08J3/075;A23L13/50;A23L13/70;A23L5/00
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 李德濺;徐冬濤

1.一種提高類PSE雞胸肉肌原纖維蛋白凝膠品質的糖基化方法，其特征在于：所述方法的步驟如下：

（1）原材料處理：將類PSE雞胸肉去除結締組織和脂肪，切成小塊并絞碎；

（2）肌原纖維蛋白的提取：將處理后的類PSE雞胸肉按質量體積比加入四倍的標準鹽溶液中，勻漿、雙層紗布過濾后，用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；然后將獲得的沉淀按質量體積比加入四倍的0.1mol/L的KCl溶液中，勻漿后用2000×g、至少10min的離心條件再次洗脫，獲得肌原纖維蛋白；

（3）糖基化處理：將獲得的肌原纖維蛋白溶于0.6mol/L的KCl和20mmol/L的磷酸鹽構成的混合溶液中，并調節肌原纖維蛋白濃度為2mg/ml～6mg/ml，再加入肌原纖維蛋白質量6倍的氨基葡萄糖，在20℃～45℃的環境下反應12h；

（4）除糖處理：將反應結束的溶液加入5倍體積的冷蒸餾水，然后用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；將洗脫獲得的沉淀按質量體積比加入四倍的0.1mol/L的KCl溶液中，再用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；再將洗脫后獲得的沉淀溶于0.6mol/L的KCl和20mmol/L的磷酸鹽構成的混合溶液中，并調節肌原纖維蛋白濃度為20mg/ml～40mg/ml；

（5）凝膠制備：將除糖后的肌原纖維蛋白溶液從25℃升到80℃后保溫至少20min，即制成蛋白凝膠；

所述步驟（2）中的標準鹽溶液為0.1mol/L的KCl、20mmol/L的K₂HPO₄/KH₂PO₄、2mmol/L的MgCl₂、1mmol/L的EGTA構成的pH值為7.0的鹽溶液；

所述步驟（3）和步驟（4）中的磷酸鹽為K₂HPO₄/KH₂PO₄；

所述步驟（5）中的凝膠制備過程中，除糖后的肌原纖維蛋白溶液采用1℃/min～1.5℃/min線性升溫至80℃。

2.根據權利要求1所述的提高類PSE雞胸肉肌原纖維蛋白凝膠品質的糖基化方法，其特征在于：所述步驟（1）中的類PSE雞胸肉為宰后24h測得的pH值低于5.8的雞胸肉。

3.根據權利要求1所述的提高類PSE雞胸肉肌原纖維蛋白凝膠品質的糖基化方法，其特征在于：所述步驟（2）中的肌原纖維蛋白的提取過程中，經標準鹽溶液勻漿過濾后的洗脫過程包括以下步驟：首先將處理后的類PSE雞胸肉按質量體積比加入四倍的標準鹽溶液中，勻漿、雙層紗布過濾后，用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；然后將一次洗脫后獲得的沉淀按質量體積比加入四倍的標準鹽溶液中，勻漿后用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；接著將二次洗脫后獲得的沉淀按質量體積比加入四倍的標準鹽溶液中，勻漿后用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；如此反復操作，用標準鹽溶液后至少洗脫三次。

4.根據權利要求1或3所述的提高類PSE雞胸肉肌原纖維蛋白凝膠品質的糖基化方法，其特征在于：所述步驟（2）中的肌原纖維蛋白的提取過程中，經0.1mol/L的KCl溶液勻漿的洗脫過程包括以下步驟：將標準鹽溶液處理洗脫后獲得的沉淀按質量體積比加入四倍的0.1mol/L的KCl溶液，勻漿后用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；將一次洗脫后獲得的沉淀按質量體積比加入四倍的0.1mol/L的KCl溶液，勻漿后用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；如此至少洗脫兩次后即可獲得肌原纖維蛋白。

5.根據權利要求1所述的提高類PSE雞胸肉肌原纖維蛋白凝膠品質的糖基化方法，其特征在于：所述步驟（4）中的除糖處理過程中，將洗脫獲得的沉淀按質量體積比加入四倍的0.1mol/L的KCl溶液，用2000×g、至少10min的離心條件洗脫；該洗脫過程至少重復一次。