[發明專利]一種降解阿特拉津的磁性釀酒酵母復合材料的制備方法

有效

• 申請號: 201711256004.6
• 申請日: 2017-12-04
• 公開（公告）號: CN107828774B
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 楊春平;鄔鑫;林燕;曾光明;余佳平;吳彬;李惠茹
• 申請（專利權）人: 湖南大學
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N11/10;C12N11/084;C12N11/04;C02F3/34;C12R1/865;C02F101/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種降解阿特拉津的磁性釀酒酵母復合材料的制備方法，包括以下步驟：

步驟1)生物炭的預處理：將生物炭進行破碎、過篩、酸洗和水洗抽濾處理后，于50～70℃真空條件下干燥12～24h；

步驟2)制備生物炭負載的磁性納米Fe₃O₄：稱取5～10g FeCl₃·6H₂O，2.5～5g FeSO₄·7H₂O溶于100ml超純水中，并將0.75～1.5g預處理后的生物炭加入上述混合液中，超聲處理5～10min，于50～55℃水浴、氮氣保護條件下，一邊攪拌一邊逐滴加入125mL 1.0mol/L的NaOH水溶液，NaOH水溶液滴加完成后繼續反應1.0～1.5h，于60～65℃下熟化0.5～1.0h，利用磁鐵實現Fe₃O₄快速沉降，棄去上清液，并用去離子水洗滌Fe₃O₄至水溶液呈中性，于50～60℃真空條件下干燥12～24h；

步驟3)釀酒酵母菌于25～30℃條件下馴化培養30～60h；

步驟4)磁性釀酒酵母復合材料的制備：將0.25～0.30g海藻酸鈉溶于9～10mL超純水中加熱至沸騰，隨后加入0.90～1.00g聚乙烯醇于上述溶液中，至完全溶解，溶解后補超純水保持混合液總體積不變并混合均勻，溶液冷卻至室溫后加入0.375～0.500g步驟2)所得納米Fe₃O₄顆粒并超聲處理3～5min，混合均勻后將其置于紫外滅菌臺進行滅菌處理，挑取步驟3)中培養的釀酒酵母孢子置于0.9％的生理鹽水當中，得到釀酒酵母孢子懸液，取1～2mL釀酒酵母孢子懸液加入海藻酸鈉，聚乙烯醇和Fe₃O₄混合體系中，混合均勻后用1mL注射器在無菌條件下將上述混合溶液逐滴滴入50～100mL CaCl₂硼酸飽和溶液中，并在室溫下放置4～10h；

步驟5)磁性釀酒酵母復合材料的培養：將步驟4)制備得到的磁性釀酒酵母復合材料，用超純水洗滌3～6次，將清洗后的復合材料置于液體培養基中振蕩培養36～72h；

步驟6)將磁性釀酒酵母復合材料用于降解阿特拉津，超純水洗滌步驟5)中培養后的釀酒酵母復合材料3～6次，釀酒酵母復合材料以20～25g/L的固液比加入含阿特拉津的廢水中，處理5～7d，每隔12～24h取樣檢測阿特拉津的殘余濃度。

2.根據權利要求1所述的一種降解阿特拉津的磁性釀酒酵母復合材料的制備方法，其特征在于：步驟1)所述的過篩所選用的篩網為200～500目，將生物炭置于0.8～1.5mol/LHCl中攪拌酸洗18～24h。

3.根據權利要求1所述的一種降解阿特拉津的磁性釀酒酵母復合材料的制備方法，其特征在于：步驟2)所述生物炭負載納米Fe₃O₄的制備過程中，鐵的總質量與生物炭的總質量之比滿足m_Fe：m_生物炭為1.95～2.05:1，反應條件為50～55℃水浴，充滿氮氣的無氧條件并高速攪拌，NaOH滴加完成后，繼續在50～55℃水浴，氮氣環境和高速攪拌的條件下反應1～1.5h，熟化階段將溫度升高至60～65℃，保持氮氣環境，關閉機械攪拌器。

4.根據權利要求1所述的一種降解阿特拉津的磁性釀酒酵母復合材料的制備方法，其特征在于：步驟3)所述釀酒酵母孢子的馴化培養過程中，固體培養基配方為酵母粉10g/L，蛋白胨20g/L，瓊脂15～20g/L，阿特拉津濃度為5～50mg/L，以達到馴化的目的。