[發(fā)明專利]一種利用香蕉穿孔線蟲伴生細菌介導(dǎo)的香蕉穿孔線蟲防治方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711255197.3 | 申請日： | 2017-12-01 |
| 公開（公告）號： | CN108018305B | 公開（公告）日： | 2020-08-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 謝輝;王東偉;陳德強;鄭小玲;丁善文;徐春玲 | 申請（專利權(quán)）人： | 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/78 | 分類號： | C12N15/78;C12N15/57;C12N1/21;A01N63/27;A01P5/00;C12R1/39 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102 | 代理人： | 單香杰 |
| 地址： | 510642 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 利用 香蕉 穿孔 線蟲 伴生 細菌 防治 方法 | ||
1.一種構(gòu)建香蕉穿孔線蟲伴生細菌介導(dǎo)的香蕉穿孔線蟲生防工程菌的方法，其特征在于，是將具有殺線蟲活性的生物酶的編碼基因轉(zhuǎn)化入香蕉穿孔線蟲伴生細菌構(gòu)建得到工程菌；
所述具有殺線蟲活性的生物酶為蛋白酶PASE4，其編碼基因的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示；
所述香蕉穿孔線蟲伴生細菌為熒光假單胞菌(
所述轉(zhuǎn)化的方式為載體轉(zhuǎn)化法或接合轉(zhuǎn)座法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，載體轉(zhuǎn)化法的具體操作方法為，使用如SEQID NO：2～3所示引物擴增蛋白酶PASE4的編碼基因，經(jīng)過酶切后連接到廣宿主表達載體pBBR1MCS-2；
接合轉(zhuǎn)座法的具體操作方法為，使用如SEQ ID NO：4～5所示引物擴增蛋白酶PASE4的編碼基因，經(jīng)過酶切后連接到載體pUTmini-Tn5，得到重組質(zhì)粒，將重組質(zhì)粒在輔助菌E.coli DH5α協(xié)助下轉(zhuǎn)移到受體熒光假單胞菌pf36中，并將蛋白酶PASE4的編碼基因整合到受體熒光假單胞菌pf36基因組中。
3.權(quán)利要求1或2所述方法構(gòu)建得到的香蕉穿孔線蟲生防工程菌。
4.權(quán)利要求3所述的香蕉穿孔線蟲生防工程菌或其發(fā)酵液在防治香蕉穿孔線蟲中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求3所述的香蕉穿孔線蟲生防工程菌或其發(fā)酵液在制備防治香蕉穿孔線蟲的制劑中的應(yīng)用。
6.一種防治香蕉穿孔線蟲的生防制劑，其特征在于，含有權(quán)利要求3所述香蕉穿孔線蟲生防工程菌和/或其發(fā)酵液。
7.一種利用香蕉穿孔線蟲伴生細菌介導(dǎo)的香蕉穿孔線蟲防治方法，其特征在于，利用權(quán)利要求3所述的香蕉穿孔線蟲生防工程菌或其發(fā)酵液防治香蕉穿孔線蟲。
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